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免疫接种疫苗是防治鱼类细菌性、病毒性疾病的有效方法。目前，疫苗免疫方式主要以注射、浸泡等方法为主，对于免疫效果的评价则除了通过鱼类血清及黏液抗体水平变化、酶（超氧化物歧化酶、溶菌酶、碱性磷酸酶等）活、淋巴细胞数量、吞噬作用、补体活性等指标来判定外，从基因水平对疫苗免疫效果进行研究也越来越受到关注。本论文利用实验室保存的鳗弧菌（Vibrio anguillarum）菌种，制备了福尔马林全菌灭活疫苗，采用注射和浸泡两种方式分别免疫牙鲆，应用实时荧光定量PCR法检测了免疫后牙鲆17种免疫相关基因表达的变化。论文主要内容如下：实验将健康牙鲆分为四组，每组60尾，第一组浸泡于浓度为1×108CFU/mL灭活疫苗菌液中，连续充气浸泡30min；第二组浸泡于海水中30min，作为浸泡组对照；第三组腹腔注射浓度为1×108CFU/mL的鳗弧菌灭活疫苗，每尾0.1mL；第四组腹腔注射0.1mLPBS，作为注射组对照。于免疫后0h、4h、8h、12h、24h、48h、72h、96h、7d、14d十个时间点取样，每组取5尾，分别剪取牙鲆脾脏、头肾和鳃3种组织，提取总mRNA并反转录为cDNA，Primer Premier5.0软件设计各基因特异性引物，以18sRNA为内参，实时荧光定量PCR检测3种组织中Toll-like受体（TLR）2、TLR5M、髓样分化因子MyD88、核转录因子（NF）-κB、白介素（IL）-1β、IL-6、肿瘤坏死因子（TNF）α、干扰素（IFN）γ、趋化因子CXC、主要组织相容性复合体（MHC）Ⅰ、MHCⅡ、T细胞表面受体CD4、T细胞表面受体CD8、免疫球蛋白（Ig）M、补体C3、c型溶菌酶、热休克蛋白（HSP）-70十七种免疫相关基因的表达。结果显示，两种方式免疫后，除TLR5M表达在脾脏和头肾中无显著变化外，各基因表达量均出现显著上调。注射组，三种组织中，TLR2、MyD88、NF-κB、IL-1β、IL-6、TNFα、IFNγ、CXC、C3、c型溶菌酶和HSP7011种基因的表达高峰出现时间在12-24h，其中，TLR2、MyD88、NF-κB、CXC、C3在鳃中的表达高峰出现较迟，在48-72h；而三种组织中MHCⅠ、MHCⅡ、CD4和CD84种基因的表达高峰在出现在48-72h，IgM的表达高峰出现在7d，各基因表达最高值是对照组的2-70倍；浸泡组，三种组织中，TLR2、MyD88、NF-κB、IL-1β、IL-6、TNFα、IFNγ、CXC、C3、c型溶菌酶和HSP7011种基因的表达高峰出现在12-48h，MHCⅠ、MHCⅡ、CD8表达高峰出现在48-96h，但CD4在头肾和鳃中表达高峰出现在72h，在脾中表达高峰出现在7d，IgM在鳃中表达高峰出现在96h，在脾和头肾中表达量在14d内逐渐上升，各基因表达最高值是对照组的2-20倍。结果表明，注射组各组织几乎所有基因的转录水平均高于浸泡组，且脾脏、头肾中最高值出现时间早于浸泡组，但鳃中各基因峰值出现时间与浸泡组相同或晚于浸泡组。研究结果丰富了免疫相关基因的分子研究，为疫苗的免疫途径及免疫效果评价提供了数据。