论文部分内容阅读
论文从分子和细胞水平围绕河豚清道夫受体(Tn-SR)的分子克隆和鉴定,以及它在LPS(lipopolysaccharide)引起的免疫反应中的功能和相关机制进行了研究,旨在阐明鱼类清道夫受体的基本生物学特征。利用生物信息学方法,本研究首次预测并克隆了哺乳动物清道夫受体A类分子SCARA5在鱼类中的同源物-河豚清道夫受体。河豚清道夫受体是典型的II.型跨膜受体,包括短的N端胞内区,跨膜区和长的C端胞外区。具备coiled-coil。胶原样和SRCR结构域,这些胞外区的结构特征与哺乳动物A类清道夫分子高度保守。位于胞内区的TRAF2结合位点和跨膜区的受体内化相关基序,与受体在免疫反应中的功能有密切关系。河豚清道夫受体主要以三聚体的形式存在,并且分布在白细胞表面。河豚清道夫受体组成型地分布在鱼类各个组织中,且当LPS刺激后,在脾脏、肌肉、脑和肾脏中表达量显著增加。河豚清道夫受体在LPS引I起的免疫反应中,具有双重功能。河豚清道夫受体胞外区能结合LPS。河豚清道夫受体参与河豚白细胞对LPS的识别和吞噬／结合,并且河豚清道夫受体内化至细胞内可能参与LPS的降解,减少LPS对细胞的毒作用和由此引起的减轻炎症反应。河豚清道夫受体不直接传递炎症反应信号从而激活NF-κB信号途径,但是对LPS引起的炎症反应起负调节作用。在斑马鱼胚胎模型上,不同浓度LPS刺激引起的NF-κB活性增强可被不同表达水平的河豚清道夫受体所抑制,导致炎症信号下降,并远远低于正常水平。体外互作实验证明河豚清道夫受体能够与肿瘤坏死因子受体相关因子2(Tumor necrosis factor receptor-associated factor2, TRAF2)直接结合。河豚清道夫受体通过结合TRAF2,竞争性地抑制肿瘤坏死因子-肿瘤坏死因子受体途径中以NF-κB活化为主要特征的炎症信号传递,从而减轻LPS对机体的影响。河豚清道夫受体的这一双重功能,为解释鱼类对LPS的高度耐受提供了证据,也为进一步认识和理解清道夫受体作为模式识别分子在先天免疫中的作用提供了新的视角。