近年来，人群肥胖率显著增加，并呈现日益年轻化的趋势。肥胖是体内脂肪组织积聚过剩的一种状态，会引发人体病理、生理状态的改变，引起各种疾病，对健康有不利影响。因此研究肥胖的发生和发展具有非常重要的意义。肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α, TNF-α）是一种重要的脂肪因子，在肥胖者脂肪组织中高表达。有研究表明，TNF-α在体外可以抑制脂肪细胞分化。在体外实验中已证实，Wnt/β-catenin信号通路是参与脂肪细胞分化的重要通路。以往的研究大都以3T3-L1前脂肪细胞系或小鼠、人原代前脂肪细胞为研究对象，已取得较多进展，但在活体内，TNF-α影响Wnt/β-catenin信号通路和早期肥胖发生的作用机制尚不完全清楚。因此本实验以db/db小鼠为为肥胖模型，并建立了db基因和TNF-α基因双缺失小鼠——OT小鼠实验模型，通过体重称量、脂肪组织切片染色、实时定量PCR和Western-Blot技术，检测了小鼠体重变化、脂肪细胞大小差异和肥胖相关因子的表达情况，探讨TNF-α对于Wnt/β-catenin信号通路和早期肥胖发生的作用机制。结果显示：1.与野生型WT小鼠相比， db/db小鼠体重增长速率明显上升（P<0.05）；小鼠腹股沟处的脂肪组织体积较大、脂肪细胞较大；在小鼠早期肥胖发生过程中， Wnt/β-catenin信号通路关键因子（Wnt10b和β-catenin）的表达被抑制（P<0.05），脂肪关键转录因子和脂质积累关键因子（如PPARγ、C/EBPα、Adiponectin等）的表达被激活（P<0.05）。同时发现Wnt/β-catenin信号通路与生脂相关因子（如PPARγ、C/EBPα）表达有一定的相关性。2.与db/db小鼠相比，OT小鼠体重增长速率明显增加（P<0.05）；小鼠腹股沟处的脂肪组织体积较大、脂肪细胞较大，且小鼠6W时差异较明显；实时定量PCR结果表明TNF-α缺失后，6W OT小鼠的C/EBPβ、PPARγ、C/EBPα、Adiponectin、ACC1、FAS的mRNA表达水平显著上升（P<0.05），Wnt10b、β-catenin的mRNA表达水平则显著下调（P<0.05）；Western-Blot分析结果也发现PPARγ、Adiponectin蛋白表达水平显著上升（P<0.05），Wnt10b、β-catenin蛋白表达水平显著下调（P<0.05）。3.使用不同浓度的Wnt/β-catenin信号通路激动剂LiCl干预db/db小鼠，其中100mg/kg和200mg/kg的剂量均可降低db/db小鼠体重增长率、升高β-catenin蛋白表达水平（P<0.05）、降低PPARγ蛋白表达水平（P<0.05）。两者效果均较理想，考虑到效果和节约药品两方面，故后续实验采用100mg/kg的干预剂量。4. LiCl干预db/db小鼠和OT小鼠，两种小鼠体重增长速率均有所下降；腹股沟处的脂肪细胞较非干预组小；实时定量PCR结果表明β-catenin的mRNA表达水平显著上升（P<0.05），而PPARγ、C/EBPα、Adiponectin、ACC1、FAS、Wnt10b的mRNA表达水平显著下降（P<0.05）；Western-Blot结果表明，β-catenin蛋白表达水平显著上升（P<0.05），PPARγ、Adiponectin、Wnt10b蛋白表达水平显著下降（P<0.05）。 LiCl作用后，OT小鼠相比于db/db小鼠，Wnt/β-catenin信号通路相关因子（Wnt10b、β-catenin）和生脂过程关键因子（PPARγ、C/EBPα、Adiponectin等）表达变化较大。以上结果显示，TNF-α对Wnt/β-catenin信号通路和早期肥胖发生具有重要影响。TNF-α通过Wnt/β-catenin信号通路影响早期肥胖过程，可能是通过关键因子β-catenin发挥作用的。这与LiCl通过激活β-catenin，激活Wnt/β-catenin信号通路这一过程类似。或许TNF-α与LiCl通过竞争拮抗机制发挥各自的作用。TNF-α与Wnt/β-catenin信号通路相互影响、共同作用，调控早期肥胖的发生过程。上述分析，有助于进一步深入了解TNF-α和Wnt/β-catenin信号通路在早期肥胖症中的具体作用机制。