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以甘蓝的19种基因型为材料,进行游离小孢子培养。研究甘蓝基因型及其影响因素对小孢子诱导培养的影响,同时以EW10、EF27、EF14、秦甘70、秦甘80等为材料,研究花蕾长度、低温处理、高温处理、AgNO3、活性炭、激素以及pH值等对甘蓝小孢子诱导培养的影响。主要结果如下:1.基因型是影响甘蓝小孢子诱导培养成功的关键因素。不同甘蓝基因型小孢子培养的诱导率差异显著。19个供试材料中有16个基因型能诱导胚状体,其中EW10、EF27、EW09、秦甘70、秦甘80等5个材料胚状体诱导频率较高;有3个材料无法获得胚状体。2.花蕾大小对小孢子培养的效果有很大的影响。通过花蕾长度进行镜检,发现3.1～4.5mm的花蕾长度的小孢子70%以上都处于单核靠边期和双核早期,表明3.1～4.5mm长度花蕾是诱导胚状体产生的最佳时期。3.低温预处理和适当的高温处理是小孢子培养中提高胚状体诱导频率的重要因素。低温预处理对小孢子胚产量有显著影响,不同基因型所需预处理时间不同。供试材料经低温预处理,小孢子胚产量均有明显提高。在小孢子培养前对花蕾进行0～4℃48h的低温预处理,并且培养初期给予小孢子33℃24h的高温暗培养,可以获得较好的诱导效果。4.培养基中添加AgNO3对甘蓝小孢子胚状体的诱导没有促进作用,添加AgNO3的处理比不添加AgNO3处理的诱导率略低。培养基中添加活性炭对甘蓝小孢子胚状体的诱导有明显影响,在附加活性炭的培养基上,各基因型胚产量所占比率在总体上有大幅度的提高。5.激素在小孢子诱导培养中具有重要的影响作用,但不同基因型对激素的反映不同。通过对供试材料在NLN-13液体培养基中添加激素6-BA与NAA 5种浓度比例,进行甘蓝小孢子诱导胚状体培养。秦甘70以无激素培养出胚率最高,为3.00胚/蕾;秦甘80以单一加入6-BA0.05mg/L激素出胚率最高,为3.75胚/蕾; EF14以6-BA0.05mg/l+NAA0.5mg/l激素组合效果较好,其出胚率为2.25胚/蕾;晚丰以6-BA0.5mg/l+0.5mg/lNAA激素组合出胚率较高,为4.25胚/蕾。pH在5.8时有利于诱导胚状体的产生,较高或较低都不利于小孢子胚状体的形成。