提高肉牛饲料中纤维素降解率益生菌的筛选及应用研究

来源 :华中农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Cary1986
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反刍动物依赖于瘤胃微生物所分泌的纤维素酶来消化单胃动物无法利用的植物性饲料。产纤维素酶的微生物,不仅可通过体外预处理青贮饲料来提高反刍动物的饲料消化率,还可通过饲喂提高其日增重和饲料消化率。本研究从提高肉牛粗饲料中纤维素利用率出发,进行纤维素降解菌株筛选和应用研究。首先以产纤维素酶为标准,从耐粗饲料的水牛瘤胃液中分离产纤维素酶菌株,接着通过玉米青贮试验筛选在体外仍具有纤维素降解能力的菌株,并进行菌株的安全性和抗逆性试验,最后研制微生态制剂,饲喂西门塔尔架子牛,试验其促生长效用。主要研究内容及结果如下:1.菌株筛选:以羧甲基纤维素降解能力作为产纤维素酶指示,从耐粗饲的杂交母水牛(尼里-拉菲水牛♂×江汉水牛♀)瘤胃液中,筛选得到8株纤维素酶活力高的菌株,分别是解淀粉芽胞杆菌2株(A、C)、地衣芽胞杆菌2株(E、CO4)、短小芽胞杆菌4株(B1、B2、D1、D2)。2.体外纤维素降解试验:将这8株菌进行滤纸降解试验和玉米微量青贮试验。所有菌株均不具有滤纸纤维素降解能力;有4株菌(A、C、D1、D2)能显著降低青贮玉米(青贮90d)中纤维素和半纤维素含量(p<0.05)。其中,与空白组相比,菌株C多降低了3.10%的纤维素含量和1.75%的半纤维素含量,提示菌株C有可作为青贮发酵增强剂,提高青贮玉米中纤维素的利用率。由于菌株C来自水牛,因此将其正式命名为SN-C。3.安全性试验:对菌株A、SN-C、D1、D2进行毒力基因鉴定、药敏试验及小鼠安全性试验筛选可制备微生态制剂的安全菌株。菌株A在纤维素酶平板上经多次纯化后菌落湿润、其在纤维素酶检测平板上生长的菌苔形态仍然不规则,则放弃其作为微生态制剂研发;菌株D1、D2含有非溶血性肠毒素nhe A和nhe C,且对一些兽用青霉素类和头孢类抗生素耐药,存在扩散耐药基因的风险,因此放弃D1、D2作为动物饲养微生态制剂研发;SN-C虽然含有非溶血性肠毒素nhe A和nhe C,但小鼠安全性试验表明其是安全的,因此选用作后继微生态制剂研发菌株。4.微生态制剂研制:将SN-C进行大规模发酵制备SN-C微生态制剂,将SN-C与SN-6、屎肠球菌HDRs Ef1按照SN-C:SN-6:Ef1=1:1:0.1的比例复配,制成SN-C复合微生态制剂。5.肉牛饲养试验微生态制剂效果:用SN-C微生态制剂、SN-C复合微生态制剂,进行为期35d的西门塔尔架子牛饲养试验。虽然SN-C单独饲喂肉牛没有提高平均日增重,但SN-C复合微生态制剂,却能极显著提高平均日增重(p<0.01)(对照组平均日增重1.34 kg/d,复合微生态制剂组平均日增重1.44 kg/d)。由于SN-C复合微生态制剂组的促生长效果优于SN-6单独饲喂组(分别是p<0.05和p<0.01),而在复合制剂中,屎肠球菌HDRs Ef1用量只有5%,提示SN-C在复合微生态制剂中具有促生长效用。本研究表明SN-C菌株能显著降低青贮玉米中的纤维素含量,半纤维素含量亦有降低趋势,证明其有作为青贮添加剂的潜能。另外,肉架子牛饲养试验提示SN-C有作为肉牛促生长微生态制剂的潜能。
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