苯丙烷途径是植物特有的次生代谢途径,也是植物三大次生代谢途径之一。在维管植物中,苯丙烷的终产物主要用于合成木质部的木质素单体和在色素合成、药物成分及微生物与植物互作方面都发挥重要作用的黄酮类物质。肉桂酸-4-羟基化酶催化苯丙烷途径中的第二步反应,将反式肉桂酸转变为p-羟基肉桂酸(即对羟基香豆酸),在整个途径中起着十分重要的作用。本研究首次从柠条锦鸡儿中克隆到肉桂酸-4-羟基化酶基因并对其进行了表达分析,具体结果如下：1运用RT-PCR及RACE技术从柠条锦鸡儿中克隆到一条肉桂酸-4-羟基化酶基因的全长cDNA序列(命名为CkC4H), GenBank登录号为HQ829860。生物信息学分析发现CkC4H长1685bp,具有完整的ORF,预测编码505个氨基酸,分子量为57850.1D。结构域分析表明CkC4H蛋白具有信号肽、跨膜结构域和典型的细胞色素P450结构域特征。CkC4H对应的gDNA序列全长4718bp,有3个外显子和2个内含子。2应用实时荧光定量RT-PCR方法检测柠条锦鸡儿不同组织部位CkC4H的表达量发现,CkC4H基因在不同组织部位表达情况有所不同,其中根中表达量最高,茎中次之,叶中表达量最低。受到创伤后,茎与叶中CkC4H基因均可被诱导表达,最高表达量出现在4小时左右,且叶中的诱导水平高于茎中。3构建了过表达双元载体35S::CkC4H并转化野生型拟南芥,在T3代转基因植物中共鉴定出8个CkC4H过表达纯合株系。采用实时荧光定量qRT-PCR方法对过表达株系的CkC4H表达量进行了检测,结果表明CkC4H基因的表达量在8个株系中均有不同程度的增加。