六味地黄丸是中医“滋补肾阴”的经典代表名方,由宋朝钱乙取《金匮要略》中的肾气丸去桂附,变“温补肾阳”为“滋补肾阴”,在《小儿药证直诀、卷下诸方》中首创,由熟地黄、山茱萸、山药、泽泻、牡丹皮和茯苓,按照比例(8：4：4：3：3：3)用一定的制剂方法制成。用于肾阴亏损,头晕耳鸣,腰膝酸软等,其味酸甜、微苦。现代药理学研究表明它具有抗衰老,调节T淋巴细胞和细胞因子,治疗糖尿病Ⅱ型疾病,调节中枢神经系统等作用。本课题选取研究对象主要为分别属于苷类、萜类、酚类、四环三萜和鞣质类,建立了质量控制的新方法,并对六味地黄丸进行了深入系统的研究。样本为市场销售六味地黄丸水蜜丸、六味地黄丸浓缩丸和六味地黄丸胶囊,共计60个批次,包括来自北京同仁堂制药厂、河南宛西制药厂、广东佛慈制药厂等共23个不同厂家。本课题对六味地黄丸的指纹图谱和质量控制进行深入系统的研究,为进一步的开发应用提供理论依据和数据支持。主要研究内容包括：(1)六味地黄丸指纹图谱研究采用梯度洗脱方法,建立六味地黄丸的HPLC-UV指纹图谱。根据色谱指纹图谱得到的整体化学信息,对六味地黄丸进行质量控制。从指纹图谱结果中选取同一厂家(北京同仁堂制药厂)生产的15个批次的六味地黄丸进行相似度分析,结果测得大部分相似度结果大于0.950,提示批次间差异较小。选取不同剂型、不同生产厂家生产的12个批次的六味地黄丸进行相似度分析,结果测得相似度结果介于0.657-0.950之间,提示不同剂型间差异较大,同一剂型不同批次的六味地黄丸差异较小,与参比标准相比,六味地黄丸胶囊相似度最高,提示其质量在三种剂型中最优。同时基于60个样本的指纹图谱,采用PLS来更深层次了解样品的质量信息,包括建立PLS-DA模型对辨别不同产品并对其进行预测,采用偏最小二乘方之对六味地黄丸的剂型行分类和建立模式预测其中的两种类型,为今后六味地黄丸的进一步开发利用提供理论依据。(2)综合运用多种质谱技术(HPLC-MS/MS和RRLC-QTOF/MS)开展对六味地黄丸中众多化学成分的定性分析前者用高效液相色谱能将六味地黄丸化学成分较好地分离,通过与质谱联用,获取紫外光谱信息,一级质谱的分子量信息,二级质谱的碎片结构信息,对六味地黄丸中21个主要成分进行确认和推断。后者用快速液相色谱,借助仪器的高灵敏度、高分辨率、样品消耗更少、高准确度等特点,探索六味地黄丸目标化和物的准确分子量,确定了11个化合物的精确分子量。通过以上两种手段,能准确定性六味地黄丸中化学成分,为六味地黄丸质量标准的制定及药效物质基础的阐明提供基础和重要依据。(3)多指标有效成分同步定量分析方法研究采用多个活性成分为指标,进一步建立六味地黄丸的定量分析方法,为质量控制提供科学依据。采用指纹图谱考察方法下梯度洗脱条件,用HPLC连接多种检测器技术的方法,建立了对六味地黄丸质量控制得研究,即HPLC-DAD-ELSD用于同时对八种主要化学成分进行含量测定,这八种成分分别为没食子酸,5-羟甲基糠醛,莫诺苷,獐牙菜苷,马钱苷,芍药苷,丹皮酚,泽泻醇B-23醋酸酯。检测波长254 nm和238 nm,样品经甲醇超声提取。实验采用TSKgel C18 (150 mm×4.6 mm,5μm)色谱分析柱。以乙腈(0.1%甲酸,A)-水(0.1%甲酸,B)为流动相,进行梯度洗脱(v/v)：0-20分钟,A 1%-12%；20-30分钟,A 12%-15%；30-70分钟,A 15%-50%；70-80分钟,A 50%-100%,最后十分钟恒定在100%乙腈。流速为1.0ml/min,柱温恒定为35℃。实验结果表明,八种化合物的最低检测限范围在1.1-19.3 ng,最低定量限范围在3.8-48.3 ng,回收率达93.47-104.62%,日内精密度和日间精密度的相对标准偏差(RSD)均小于3.87%,说明该方法准确可靠,操作简便,为对六味地黄丸的质量控制和进一步开发研究提供了科学依据。