黄花菜水醇提取物的抗抑郁和促睡眠活性及综合利用研究

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黄花菜在我国以及东亚其他地区种植广泛,资源丰富,作为一种历史悠久的特色蔬菜,深受大众喜爱。但长期以米大量的黄花菜资源仅处于初级加工的水平,附加值低,经济效益差。中国乃至亚洲的传统医学,包括现代临床医学都认为黄花菜具有解郁安神的独特神经药理学功能,但到目前为止,相关报道很少,缺乏系统性和深入性,已经成为利用该丰富资源的主要障碍。本文以探索黄花菜的神经药理学功能为出发点,在黄花菜的神经药理学特性、关键活性物质分析、作用机理、安全性、活性物质萃取精制以及副产物多糖综合开发利用等亟待探索的方面进行了系统研究,主要结果如下:(1)黄花菜水醇提取物具有口服抗抑郁活性,其中黄花菜75%乙醇提取物(HCE75)的活性最强,芦丁和橙皮苷是关键的活性物质。芦丁和橙皮苷在HCE75中天然存在的比例75:21.5(w/w)、以及50:50(w/w)和21.5:75(w/w)条件下均表现为相互拮抗作用,交互系数分别为1.87、1.64和1.44,其可能的原因是弥散性神经递质间信号路径的相互干扰,或是黄酮糖苷类物质在吸收与代谢阶段的相互竞争。HCE75的抗抑郁活性在400mg/kg剂量时达到峰值,较阳性对照氟西汀的效果有显著差距。大脑神经化学分析结果显示,HCE75的神经药理学作用区域是大脑前额皮层和海马体,涉及其中的5-羟色胺和多巴胺弥散性神经递质系统,不涉及去甲肾上腺素系统。在经灌胃给予800mg/kg或更高剂量HCE75时,在悬尾实验和强迫游泳实验中,小鼠的不动时间呈增加赵势的现象,即U型活性变化规律,不是由于HCE75的抗抑郁活性减弱导致的。HCE75抗抑郁活性的发挥与5-HT系统中5-HT1A、5-HT2A和/或5-HT2C,和5-HT3受体信号路径,以及多巴胺系统中D1和D2受体信号路径有直接关系。(2)黄花菜水醇提取物不具有口服促睡眠活性,但在腹腔注射给药方式下,具有一定的促睡眠活性,其中HCE75的活性最强,与芦丁和橙皮苷有关。HCE75的促睡眠活性在800mg/kg剂量时达到峰值,较阳性对照安定的效果有显著差距。其涉及的神经药理学机理与芦丁和橙皮苷的已知机理基本一致,不涉及经典的GABAA-BZD受体信号路径。长期(21d)灌胃给予1600mg/kg或3200mg/kg剂量的HCE75可以强化小鼠大脑脑衍生神经营养因子系统和5-HT系统,表现出长期促睡眠作用。长期(21d)腹腔注射给药方式没有该效果。(3)研究中发现HCE75粉末易吸湿结块,严重影响产业化加工与推广,本文采用GAB模型建立了HCE75的吸湿等温线,利用高登泰勒模型研究了吸附水对其的塑化作用,提供了有助于产品化的参数指标。拟合结果表明在5、25和35℃下,保证HCE75保持化学性质稳定的临界含水量为2.56、2.51和2.23g/100g干基,保证其物态稳定的临界含水量为4.87、3.22和2.49g/100g干基。(4)提取HCE75后的残渣中的多糖物质具有综合开发利用价值,本文采用中心旋转设计为基础的响应面法优化了从残渣中水提黄花菜多糖的工艺参数,为提取温度88℃,提取时间115min,液料比27,在该条件下黄花菜多糖(PHC)的产率为28.0±2.5%,其中总糖含量为89.6±3.2%,蛋白质含量为0.8±0.1%,糖醛酸含量为12.2±1.3%。PHC是一种杂质很少的酸性类果胶多糖,其总还原能力较强,具有阻断自由基链式反应传递的抗氧化活性,但对易引发自由基链式反应的H2O2和Fe2+的清除能力较低,同时可以有效阻止自由基导致的脂质过氧化反应的发生。
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