【摘 要】
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研究PLZH-RARα、RARα-PLZF以及PLZF-RARα-PLZFTM不仅有助于进一步加深对APL发病机制、维甲酸诱导分化的了解,而且对于彻底揭示CML的发病机制、APL与CML的内在联系以及理解
【出 处】
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上海第二医科大学 上海交通大学医学院 上海交通大学
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研究PLZH-RARα、RARα-PLZF以及PLZF-RARα-PLZFTM不仅有助于进一步加深对APL发病机制、维甲酸诱导分化的了解,而且对于彻底揭示CML的发病机制、APL与CML的内在联系以及理解其他髓系白血病等多个方面都具有重要的意义.转基因动物模型是研究基因功能和基因问相互作用的重要手段.我们在血研所原有研究的基础之上,利用SPF(Speceficpathogen-free,无特定病原体)级小鼠重新建立了PLZF-RARαTM模型.通过针对PLZF-RARα基因融合部位和载体片段的DNA-PCR及Southern blot鉴定了整合有PLZH-RARα的转基因小鼠,用巢式RT-PCR检测到发病小鼠骨髓中PLZF-RARα的表达.经过对该转基因小鼠进行仔细地观察,我们发现其外周血象、骨髓细胞形态分类以及脾脏变化等方面均与CML类似.该小鼠的骨髓、脾脏、肝脏病理学改变以及骨髓和脾脏的造血细胞表面抗原的表达变化也符合CML的特性.为了从全基因组水平了解PLZF-RARα在转基因小鼠造血细胞中引起的基因表达网络的变化,我们以发病小鼠的骨髓细胞为样本、以阴性同胞的骨髓细胞为对照,利用含有8722个基因的cDNA阵列,在该研究所已有的技术平台上进行了表达谱的分析.为了更加全面地研究t(11;17)(q23;q21)染色体易位在APL细胞中的作用机制,我们构建了hCG-RARa-PLZF转基因载体,并利用SPF级小鼠初步建立了RARα-PLZF转基因小鼠模型.通过DNA-PCR、Southernblot分析,我们已经确立了RARα-pLZFTM的基因型.
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