IL-27在多发性骨髓瘤患者体内表达及其对骨髓瘤细胞株生物学活性的影响

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背景:多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)是一种恶性浆细胞疾病,主要表现为恶性浆细胞增生、单克隆免疫球蛋白增高及相关器官功能损害。既往研究表明,IL-6细胞因子家族对MM的发生、发展起到关键性作用。gp130是IL-6细胞因子家族受体系统的信号转导链,gpl30激活是骨髓瘤细胞异常增殖的最重要信号。IL-27是近年发现的一种新的IL-6/IL-12细胞因子家族成员,具有复杂的生物学功能,在抗感染免疫、抗肿瘤免疫和自身免疫病中发挥着重要的作用。IL-27作为IL-6/IL-12家族的成员,亦是通过gpl30传递信号。IL-27与IL-6共享gp130,难道也在MM发生发展中起着促进作用,抑或表现出相反的作用。截止目前,尚无关于IL-27在MM患者体内表达分泌情况及IL-27对骨髓瘤细胞生物学效应的报道。目的:检测IL-27在MM患者体内表达及对骨髓瘤细胞株生物学活性的影响。方法:(1)ELISA方法检测MM患者血浆中IL-27及IL-6水平;(2)ELISA方法检测骨髓瘤细胞株U266、RPMI8226培养上清中IL-27水平;(3)采用Ficoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMNCs);(4)Real-time PCR方法检测MM患者PBMNCs中IL-27mRNA表达水平;(5)流式细胞术检测U266、RPMI8226细胞表面IL-27受体(WSX-1/TCCR和gp130)的表达水平;(6)MTT法及流式细胞术测定rhIL-27对U266、RPMI8226细胞增殖和凋亡的影响;(7)ELISA方法检测rhIL-27刺激前后U266、RPMI8226细胞培养上清中IL-6和VEGF水平。结果:(1)MM患者血浆IL-27水平为(61.82±8.01)pg/ml,明显高于正常对照组[(8.29±4.41)pg/ml](P<0.05);MM患者血浆IL-6水平为(45.62±1.24)pg/ml,明显高于较正常对照组[(2.27±0.18)pg/ml](P<0.05)。(2)U266、RPMI8226细胞培养上清中IL-27水平分别为(50.06±5.72)pg/ml和(335.47±41.88)pg/ml。(3)RT-PCR结果证实MM患者PBMNCs中IL-27mRNA较正常对照组明显升高(P<0.05)。(4)流式细胞术检测发现IL-27受体(WSX-1/TCCR和gp130)在U266、RPMI8226细胞表面具有很高的阳性表达率。(5)MTT实验结果表明,rhIL-27可显著抑制U266、RPMI8226细胞增殖,呈现时间和剂量依赖性;流式细胞术检测发现100ng/ml IL-27处理U266、RPMI8226细胞72h后细胞凋亡率明显增加(P<0.05)。(6)rhIL-27抑制U266、RPMI8226细胞分泌IL-6和VEGF(P<0.05)。结论:(1)多发性骨髓瘤患者外周血中IL-27的水平增高,骨髓瘤细胞株U266、RPMI8226自分泌IL-27。(2)然而,rhIL-27抑制U266、RPMI8226细胞增殖,诱导细胞凋亡;rhIL-27抑制U266、RPMI8226细胞分泌IL-6和VEGF,提示IL-27可能通过下调IL-6和VEGF的分泌而产生抗骨髓瘤作用。
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