【摘 要】
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目的探讨神经干细胞移植治疗脊髓损伤的方法及其有效性。方法原代培养神经干细胞,体外无菌环境中分离脊髓组织,剪碎吹散后,置于神经干细胞培养基中进行细胞培养,并作传代培养,3代
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目的探讨神经干细胞移植治疗脊髓损伤的方法及其有效性。方法原代培养神经干细胞,体外无菌环境中分离脊髓组织,剪碎吹散后,置于神经干细胞培养基中进行细胞培养,并作传代培养,3代后离心浓缩神经干细胞,分成神经单细胞悬液和神经球两组,4℃冷藏保存。实验分神经单细胞悬液、神经球、生理盐水三组,对60只采用改良Allen法制备大鼠脊髓T10损伤模型的SD大鼠随机分组,对神经单细胞悬液和神经球两组进行神经干细胞移植。于术后3、7、14、21、28d对模型大鼠采用BBB评分系统监测大鼠运动功能恢复情况,并于术后3、7、l4、21、28d取材,应用组织学和免疫荧光染色方法观察脊髓组织及神经细胞的变化,并用免疫荧光法标记神经元,观察其分化比例,运用统计学方法对数据进行统计分析。结果移植组后肢运动功能评分3天无明显改善,随时间延长而逐渐升高,移植7天时后肢运动功能有所改善,但与对照组无明显差异。损伤后3天、7天神经球实验组MAP-2细胞数较两个对照组也无统计学意(P>0.05)。14天、21天、28天实验组BBB评分分别为(14.8±1.5)、(16±0.8)、(17.8±2.4)经统计后,效果明显优于其它两个对照组(P<0.05),而且对照组2优于对照组1,经统计有统计学意义。14、21、28天MAP-2阳性细胞数分别为(17.0±1.0)、(18.8±1.5)、(19.4±3.6)均明显高于其它两个对照组,经统计分析亦有统计学意义(P<0.05)。结论神经球移植可以增加神经元的分化比率,促进其向神经元方向分化,更有利于脊髓损伤后的功能恢复。
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