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RIP3 是受体相互作用蛋白家族(receptor interacting protein family,RIPs)的成员,在肿瘤细胞中低表达或不表达。我们前期研究发现,重组绿豆胰蛋白酶抑制剂LBBI(Bowman-Birk Inhibitor)能激活肿瘤细胞中RIP3的表达,并诱导肿瘤细胞凋亡。因此,推测RIP3在肿瘤细胞中的表达激活能诱导肿瘤细胞凋亡,但是相关的机制尚未明确。RIP3 具有蛋白激酶结构域、RHIM(RIP homotypic interaction motif)、NES(Nuclear export signal)、NLS(Nuclear localization signal)等结构域。RIP3 通过何种结构域诱导细胞凋亡,其相关的凋亡通路是什么以及LBBI如何激活肿瘤细胞表达RIP3是本研究需解决的问题。利用生物信息学软件对RIP3进行了分析发现,RIP3的N末端100～200位之间有三个NES,在氨基酸残基300以后可能存在着一个NES,未能发现RIP3有典型的NLS;而在RIP3的C末端417以后存在一个RHIM。通过PCR方法将N末端的三个NES进行缺失突变后证实缺失N末端的突变体能诱导肿瘤细胞MCF-7凋亡,而缺失C末端的RHIM不能诱导细胞凋亡。进一步研究发现,RIP3及缺失N端的突变体能够通过激活Caspase3、Caspase9、Caspase8诱导细胞凋亡。重组绿豆LBBI处理MCF-7细胞证实绿豆LBBI能够诱导肿瘤细胞MCF-7细胞凋亡,并且激活了 RIP3在MCF-7细胞中表达。不仅如此,我们还证实了 LBBI能够下调KLK6在MCF-7细胞中表达并上调IGFBP3表达。过表达RIP3不影响KLK6在MCF-7细胞中的表达。此外,过表达IGFBP3能上调RIP3在MCF-7细胞中表达。基于上述结果,我们认为RIP3在肿瘤细胞MCF-7高表达能诱导细胞凋亡,该凋亡过程需要RHIM结构域的存在和至少需要一个核输出信号。重组绿豆LBBI诱导肿瘤细胞MCF-7凋亡是通过其能够抑制KLK6表达和分泌,进而上调了 IGFBP3表达,最力后激活RIP3来诱导肿瘤细胞MCF-7通过Caspase途径诱导肿瘤细胞凋亡。因此,RIP3可能成为治疗恶性肿瘤的药物靶点,为肿瘤治疗提供了新思路。