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非酒精性脂肪肝病(NAFLD)是一种无过量饮酒史的临床病理综合征,病理特征为肝细胞脂肪变性和脂肪贮积,NAFLD的病理变化随病程的进展表现为单纯性脂肪肝、非酒精性脂肪性肝炎、肝纤维化、肝硬化甚至肝癌。近年来,随着人们生活水平和饮食结构的改变,NAFLD的发病率逐年增加,这种疾病也越来越受到人们的重视,尤其是在西方国家,而且NAFLD也是动物的原发或继发性疾病,不仅影响着养殖业的发展,也会带来一定的食品安全问题。但是这种疾病的发病机制还不是很清楚,目前“二次打击”学说得到了多数科研工作者的认可,即胰岛素抵抗和氧化应激。有很多研究报道NF-E2相关因子2(Nrf2)在NAFLD的发病过程中起着重要的作用,是细胞抵抗氧化和电子损伤的关键转录因子,正常生理情况下,Nrf2的活性会被Keap1蛋白抑制,当NAFLD患者机体发生氧化应激的时候,N rf2会与Keapl蛋白解偶联,Nrf2进入细胞核与反应元件ARE结合,调控氧化应激和Ⅱ相解毒酶基因的表达,起到抗氧化的作用,进而保护肝脏。本试验的研究目的为通过建立小鼠非酒精性脂肪肝的模型,研究在NAFLD的发病过程中普通小鼠和Nrf2基因缺失鼠胰岛素抵抗和氧化应激相关指标的变化,以及肝脏中Nrf2与氧化应激相关基因的表达差异,以评价胰岛素抵抗、氧化应激和Nrf2转录因子在NAFLD1中的作用。本研究将40只野生雄性ICR小鼠预饲一周后,随机分为4组,每组10只,分别是四周止常对照组(WT-4w-NC)、四周高脂组(WT-4w-HFD)、八周正常对照组(WT-8w-NC)、八周高脂组(WT-8w-HFD)。将40只Nrf2基因敲除小鼠止常饲喂一周后随机分为四组,每组十只,分别是四周正常对照组(KO-4w-NC)、四周高脂组(KO-4w-HFD)、八周正常对照组(KO-8w-NC)、八周高脂组(KO-8w-HFD)。正常组饲喂基础饲料,高脂组饲喂高脂饲料,分别于试验的四周末和八周末,观察小鼠状态并称量体重后将小鼠眼球采血处列,分离血清用于血液生化指标和胰岛素抵抗相关细胞因子瘦素和脂联素的测定,解剖小鼠,观察并称量小鼠肝脏,计算肝指数,部分肝组织用于肝脏氧化应激相关指标的测定,部分组织用于病理学检测,提取肝组织中的RNA用于荧光定量检测Nrf2以及Nrf2调控的氧化应激相关基因的表达差异。本研究结果显示,与正常组小鼠相比,高脂组小鼠毛发油腻,精神萎靡,肝脏呈棕黄色,肝湿重和肝指数显著升高,小鼠血液中部分生化指标如谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白(LDL)均显著升高,肝组织病理切片显示高脂组出现明显的脂肪变性,说明高脂诱导致使小鼠发生了明显的脂肪肝病变。高脂组小鼠血液中的胰岛素抵抗指数明显的高于相应的正常组,具有显著的瘦素抵抗和低脂联素血.症,且抗氧化剂谷胱甘肽(GSH)和超氧化物歧化酶(SOD)活力显著降低,丙二醛(MDA)显著升高；高脂Nrf2基因缺失鼠中胰岛素抵抗指数、瘦素和MDA明显高于野生型高脂组,脂联素、GSH和SOD显著低于野生型高脂组,说明NAFLD模型鼠中存在着明显的胰岛素抵抗和氧化应激,且Nrf2基因缺失鼠中,胰岛素抵抗和氧化应激更加严重。与野生型正常组小鼠相比,野生型高脂组小鼠肝脏中Nrf2和Nrf2调控的相关基因如血红素加氧酶(HO)、超氧化物歧化酶1(SOD-1)、NADPH醌氧化还原酶I(NQO1)、谷胱甘肽硫转移酶I (Gsta-1)和γ-谷氨酰半胱氨酸酶催化亚单位(GCLC)表达均显著上调；与野生型高脂组相比,基因缺失型高脂组小鼠肝脏中Nrf2调控的相关基因的表达均显著降低,说明Nrf2能够上调抗氧化基因和H相解毒酶基因的表达,延缓NAFLD疾病进程。