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目的研究微量元素锌对正常和胰岛素抵抗L6骨骼肌细胞葡萄糖消耗量和胰岛素信号传导通路中关键分子Akt-GSK3β、GLUT4和m TOR-S6K1的影响,为进一步研究锌与胰岛素抵抗及其与糖尿病的关系提供实验和理论依据。方法取代数低（<30代）并处于对数生长期的L6成肌细胞,采用含10%胎牛血清的低糖DMEM培养液培养L6成肌细胞,细胞铺板至密度达60%～70%左右时采用含5%马血清的低糖DMEM培养液将其分化为成熟L6骨骼肌细胞;用不同浓度的棕榈酸作用24h,观察不同浓度棕榈酸对细胞活力的影响,并测定不同浓度棕榈酸对细胞对葡萄糖的消耗能力的影响,据此确定适当的造模剂量。确定造模剂量后,用100nmol/L胰岛素和/或不同浓度的锌（0,10,20,50,100μmol/L）作用于胰岛素抵抗细胞3h,采用MTT法测定不同浓度的锌对胰岛素抵抗细胞活力的影响,根据MTT结果选取葡萄糖消耗量实验适宜的锌干预浓度,采用葡萄糖氧化酶法检测不同浓度锌对基础状态和胰岛素刺激状态下正常和胰岛素抵抗细胞的葡萄糖消耗量的影响。根据锌对正常和胰岛素抵抗细胞葡萄糖消耗量的影响实验,选取适宜的锌干预剂量进行Akt-GSK3β和m TOR-S6K1蛋白检测,用100nmol/L胰岛素和/或不同浓度的锌（0,10,20,50μmol/L）作用于正常细胞和胰岛素抵抗L6骨骼肌细胞15min,Western blot法检测胰岛素信号传导通路中关键蛋白分子Akt-GSK3β和m TOR-S6K1的表达水平,同时,采用低剂量的锌（10μmol/L）干预正常和胰岛素抵抗细胞,免疫荧光法检测GLUT4蛋白,初探其在细胞膜上的转膜情况,探讨锌作用于正常骨骼肌细胞和胰岛素抵抗细胞的分子机制。结果采用剂量为0.4mmol/L的棕榈酸作用24h能成功造成L6骨骼肌细胞胰岛素抵抗模型。锌能明显提高胰岛素抵抗L6骨骼肌细胞的活力:基础状态下,50μM、100μM的锌干预后细胞活力明显提高（P<0.05）,胰岛素刺激状态下,50μM锌干预后细胞活力明显高于胰岛素单独刺激组（P<0.05）。锌对正常和胰岛素抵抗L6骨骼肌细胞的葡萄糖消耗能力均有上调作用:对于正常L6骨骼肌细胞,10、20、50、100μM锌能明显提高其基础状态下的葡萄糖摄取水平;对于胰岛素抵抗L6骨骼肌细胞,较高剂量的锌（20、50、100μM）不仅能明显提高其基础状态下细胞对葡萄糖的摄取水平,还能提高其在胰岛素刺激状态下的葡萄糖摄取水平。锌对正常细胞胰岛素信号传导通路中关键蛋白的影响:在基础状态下,20、50μM锌均能明显提高正常细胞AKT Ser473和GSK3βSer9的磷酸化表达水平,在胰岛素刺激状态下,50μM锌能明显提高其AKT Ser473和GSK3βSer9的磷酸化表达水平,低剂量的锌（10μM）尽管有促进GLUT4转膜的趋势,但差异没有统计学意义,50μM的锌能明显提高正常细胞胰岛素刺激状态下m TOR总蛋白的表达,而20μM锌能明显提高正常细胞基础状态下p-m TOR的表达,但锌对其下游分子S6K1的表达的影响尚无统计学差异。锌对胰岛素抵抗细胞胰岛素信号传导通路中关键蛋白的影响:在基础状态下,50μM锌能明显提高胰岛素抵抗细胞AKT Ser473和GSK3βSer9的磷酸化表达水平,在胰岛素刺激状态下,20μM锌能明显提高其AKT Ser473的磷酸化表达水平,低剂量的锌（10μM）尽管有促进GLUT4转膜的趋势,但差异也没有统计学意义,50μM的锌能明显下调胰岛素抵抗细胞基础状态下m TOR总蛋白和S6K1蛋白的表达,同时,该剂量的锌能明显下调胰岛素抵抗细胞胰岛素刺激状态下m TOR、p-m TOR、S6K1、p-S6K1的表达。结论一定剂量的锌具有抑制高脂致L6骨骼肌细胞胰岛素抵抗的作用,其机制可能与其激活AKT/GSK3β和抑制m TOR/S6K1信号通路,最终改善葡萄糖消耗量有关。