渔用麻醉剂MS-222残留量的测定及在大菱鲆体内富集消除规律研究

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3-氨基苯甲酸乙酯甲基磺酸盐(Anesthetic tricaine mesilate),俗称MS-222,是目前在世界范围内广泛使用的渔用麻醉药物,由于它使用方便,安全性高,麻醉效果明显并且对处理过的鱼虾类和人体本身都没有伤害,已经经过美国食品药物管理局(FDA)的认证,得到越来越广泛的应用。尽管这种药物是安全的,它在许多国家都没有允许用作兽药,因而在这种情况下,3-氨基苯甲酸乙酯甲基磺酸盐在任何水产品中都不得检出。为了保证食用安全,必须严格监控该药物在水产品中的残留。检测水产品中MS-222的残留浓度可以进一步提高食用水产品的安全性以及可靠性,因此有必要建立水产品中MS-222的检测方法,并对其在水产品中的富集及消除规律进行研究。首先,本论文建立了液相色谱-串联质谱法测定水产品中麻醉剂3-氨基苯甲酸乙酯甲基磺酸盐(MS-222)残留量的方法。样品用50%的甲醇以及醋酸-醋酸钠缓冲溶液(pH=4.2)进行提取,提取液经C18固相萃取柱净化处理后用液相色谱-串联质谱仪进行测定,外标法定量。色谱柱采用MGⅡ C18色谱柱,以0.5%的甲酸溶液和乙腈(v:v=60:40)为流动相进行梯度洗脱,流速为0.2mL/min。在电喷雾电离源正离子模式下,取m/z166作为母离子,m/z138作为定量离子,m/z77作为定性离子。本方法在水产品中的检测限为1μg/kg,在数十种空白样品中的添加回收率均可以达到80%-110%,方法操作简便,重现性和回收率均较好。其次,选择一种水产品,即大菱鲆,在12-13℃海水温度下采用药浴的方式对大菱鲆进行麻醉确定MS-222对大菱鲆的有效浓度。通过观察记录大菱鲆在不同浓度的MS-222药液中的麻醉效果,包括麻醉、苏醒过程中的行为变化,呼吸频率的变化以及药浴60h后的成活率,最终确定MS-222对大菱鲆的麻醉有效浓度为60mg/L。最后,进行MS-222在大菱鲆体内的富集和消除实验,大菱鲆体长20-25cm,体重250-350g/尾。药浴浓度为60mg/L,富集实验持续60h。随后进行消除试验,每隔4h随机取出三条大菱鲆进行MS-222浓度的测定。结果表明,MS-222在大菱鲆肌肉中的最高浓度可以达到4.78±1.88mg/g,而在肝脏中的蓄积能力更强一些,最高浓度可以达到6.79±1.51mg/g。肌肉和肝脏对于MS-222的消除时间也有差别,肌肉中为48h,肝脏为52h。由于影响水生生物药代动力学的因素较多,MS-222在不同大菱鲆体内的消除情况有很大差异。因此,建议在12℃-13℃的给药条件下连续药浴60h,休药期为3天。实验表明,MS-222麻醉大菱鲆成鱼,鱼体入麻时间短、复苏快,经MS-222药液处理过的活鱼在清水中贮养一段时间后再食用是比较安全的。因此MS-222是一种理想的水产麻醉剂。
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