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本研究采用电刺激法对18头黑熊进行了23次精液采集，成功采得精液12次。黑熊每次射精量平均体积0.259±0.185ml，PH值7.0±0.0，密度13.90±8.19×10~8／ml，活力75.83±14.29％，运动状态3.75±0.27，畸形率23.09±9.54％，顶体完整率80.17±13.26％。 本研究采用三种麻醉方案对黑熊进行麻醉：单纯盐酸氯胺酮麻醉、盐酸氯胺酮与龙朋混合麻醉、盐酸氯胺酮与鹿眠宁混合麻醉。结果表明盐酸氯胺酮与龙朋混合麻醉是一种较适合黑熊电刺激采精的麻醉方案，其用药量盐酸氯胺酮8.44mg／kg体重、龙朋1.37mg／kg体重，诱导期长为13.2min。 黑熊鲜精采用TEST、SFS、GFS三种不同冷冻稀释液稀释进行冷冻，冷冻解冻后的精子活力和运动状态分别为：16.67％、25.00％、34.60％和3.0、3.3.、3.08；顶体完整率分别为24.67％、36.40％、35.12％，三者之间均无显著差异(p＞0.05)，以GFS液为冷冻稀释液冷冻解冻后的复苏率最高为46.13％。采用三种不同冷冻方法进行冷冻。方法A冷冻解冻后的活力、顶体完整率和复苏率分别为25％、36.4％和29.41％，高于方法B和方法C(方法B：15.92％、31.79％、19.21％；方法C：20％、35.33％、25％)，三者之间均无显著差异(p＞0.05)。冷冻解冻后，精子在Ham’s F10液中活力为25％，存活时间为6.5h，高于在TCM-199中的活力和存活时间(18.10％，6.4h)。 精子体外获能液以S-TALP液为基础，选择添加不同的促获能物质，组成三种不同的获能液；(1)S-TALP+20ug／ml肝素+5mmol／L咖啡因组；(2)S-TALP+20ug／ml肝素+5％FCS组；(3)S-TALP+45umol／L肾上腺素+70umol／L牛磺酸组。黑熊精子获能处理后与经高渗盐溶液固定的小鼠卵子作穿卵实验，三组不同获能处理的精子附着卵子透明带的比例均为100％；穿入透明带但小于1／2ZP的，以牛磺酸与肾上腺素组最高为60％，显著高于其它两组(P＜0.05)；经肝素与咖啡因组处理的精子的穿卵率(穿入透明带＞1／2ZP+穿入卵周隙PVS％)为70.56％；经肝素与FCS组处理的精子穿卵率为52.63％，两者之间无显著差异，都大于添加肾上腺素和牛磺酸组精子的穿卵率(30％)，差异显著(p＜0.05)。