本文提出转铁蛋白介导的石杉碱甲纳米结构脂质载体(Tf-NLC-HupA),并将其用于脑靶向递药系统的研究。由于血脑屏障的存在限制了阿尔茨海默病(AD)的治疗,为此构建了配体-受体介导的纳米结构脂质载体,选择石杉碱甲(HupA)为模型药物,以Tf作为主动靶向的靶头,以脑毛细血管内皮细胞上过量表达的转铁蛋白受体作为靶点,特异性将药物导入病变部位实现脑靶向。主要内容包括六个部分：(1)制剂处方前研究；(2)石杉碱甲纳米结构脂质载体的制备及性质；(3)转铁蛋白介导石杉碱甲纳米结构脂质载体的制备及性质；(4)转铁蛋白介导石杉碱甲纳米结构脂质载体的药动学研究；(5)转铁蛋白介导石杉碱甲纳米结构脂质载体的大鼠体内分布；(6)石杉碱甲纳米结构脂质载体对PC12细胞损伤的保护。本章建立了体外RP-HPLC法测定Hup A的含量。在选择的质量浓度5～100μg·mL-1范围内线性关系良好,精密度、回收率、检测限和定量限均符合方法学要求。Hup A微溶于水,脂溶性较强,为小分子弱碱。选择离心超滤法测定NLC-Hup A的包封率。确定熔融超声-高压乳匀法制备NLC-Hup A,以粒径和包封率为评价指标,考察了处方及工艺因素对制剂质量的影响。采用Box-Behnken效应面法进行处方优化,对NLC-Hup A的基本性质、体外释放和冻干工艺进行了考察。其粒径为(121.67±3.21)nm,Zeta电位为(-22.93±0.91)mV,包封率和载药量分别为(89.18±0.28)%和(1.46±0.05)%。DSC实验证实,药物以无定形或不规则结晶态存在NLC中。体外释放显示在初期发生药物突释,随后药物呈缓释,以Weibull模型拟合结果较好。确定了冻干工艺,以5%海藻糖作为冻干保护剂保护效果最好。建立了采用硫氰铁铵显色法测定纳米粒中磷脂的含量；建立了BCA法测定Tf的含量,在质量浓度0-1000μg·mL-1范围内线性关系良好,精密度和回收率符合要求。通过DSPE-PEG2000-COOH将Tf与NLC混悬液在一定条件下孵化偶合,根据DSPE-PEG2000-COOH上的活性羧基末端与Tf上的氨基反应制备Tf-NLC-HupA,采用离心超滤法进行分离纯化,BCA试剂盒测定Tf结合率。以双功能PEG为“桥梁”,选择Tf为靶向基团制备了Tf-NLC-HupA,结果表明,Tf连接到NLC-HupA从设计到合成是可行的。考察了Tf-NLC-HupA的基本性质,与NLC-HupA相比,粒径有所增加,Zeta电位绝对值降低,包封率和载药量未有明显变化,体外释药在初期加快。建立了HPLC/Q-TOF MS法测定大鼠血中Hup A含量的方法,并对该法进行了方法学验证,结果表明其准确可靠,灵敏度高,专属性强,重现性好。采用DAS 2.0软件对其血药浓度进行房室模型拟合,结果均符合三室模型。采用非隔室模型计算了体内药动学参数,Tf-NLC-Hup A组与Hup溶液组相比,其半衰期延长了5.31倍,与普通NLC-Hup A组比较其半衰期延长了2.00倍。Tf-NLC-Hup A组曲线下面积AUC值显著增大,其平均滞留时间MRT与Hup溶液组相比延长4.92倍,与普通NLC-Hup A组相比1.99倍。表明Tf-NLC-Hup A可以显著延长Hup A的体内循环时间。采用HPLC/Q-TOF MS法研究大鼠体内的组织分布过程,并通过Ce、re和Te定量地评价其脑靶向性。结果表明,与Hup A溶液组和NLC-Hup A组相比,Tf-NLC-HupA组在血浆和脑中的分布量显著提高。从r。上比较,Tf-NLC-HupA在心、肝、脾和肾中均低于NLC-Hup A,在肺和脑(re=3.70)中均高于NLC-Hup A。从Te上比较,Hup A溶液在大鼠体内分布较广泛,只有在脑中分布较少(Te=0.05)；NLC-Hup A在肾中分布减少,在脑中靶向效率有所提高(Te=0.09)；Tf-NLC-Hup A在心和肾中分布减少,在脑中靶向效率明显提高(Te=0.14)。从而进一步说明,将HupA制备成Tf-NLC-Hup A可使药物在体内产生特异性分布,在提高脑靶向作用的同时,降低其可能带来的肾毒性作用。建立AD细胞模型,通过MTT法测定细胞活度,确定Aβ25-35损伤PC12细胞的有效浓度为20.00μmol/L。Hup A溶液、NLC-Hup A、Tf-NLC-Hup A保护PC12细胞免受AB25-35毒性损伤的最佳浓度为10.00μmol/L,且Tf-NLC-Hup A保护作用最好。游离Tf的存在可抑制Tf-NLC-Hup A与PC12细胞结合。FCM分析了Hup A溶液、NLC-Hup A, Tf-NLC-Hup A能抑制AB25-35诱导的PC12细胞的凋亡,结果表明Tf-NLC-Hup A对PC12细胞的保护作用明显高于Hup A溶液和NLC-Hup A。