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目的1.探讨桥本甲状腺炎(Hashimoto thyroiditis,HT)甲状腺组织Th1细胞因子γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)与凋亡蛋白Fas之间的关系。2.探讨Th1细胞因子IFN-γ对大鼠甲状腺细胞系(FRTL-5细胞)Fas表达的调控。方法1.桥本甲状腺炎甲状腺组织来源于甲状腺病理组织切片,收集甲状腺腺瘤旁正常甲状腺组织作为正常对照组;采用免疫组织化学方法检测HT和正常甲状腺组织中IFN-γ及Fas的表达和分布。2.对体外培养的FRTL-5细胞,采用两种干预方法:(1)使用终浓度为40 ng/ml的IFN-γ分别干预FRTL-5细胞6、12、24、48、72h为IFN-γ刺激组,未经IFN-γ作用的FRTL-5细胞为对照组,收集细胞用于后期检测;(2)终浓度分别为5、10、20、40、80 ng/ml的IFN-γ干预FRTL-5细胞为IFN-γ刺激组,未经IFN-γ作用的FRTL-5细胞为对照组,培养48h后收集细胞用于后期检测。3.使用TRIzol提取FRTL-5细胞总RNA;逆转录试剂盒合成c DNA。应用Real-Time PCR检测各组细胞Fas m RNA的表达水平,基因表达量用2-ΔΔCt相对量表示。4.采用FACSVerse流式细胞仪,分析在不同浓度IFN-γ干预条件下FRTL-5细胞Fas蛋白表达。结果1.正常甲状腺组织内IFN-γ表达阴性,Fas阳性表达甲状腺滤泡细胞不明显。在被检的HT患者组织切片中,均见到浸润的淋巴细胞IFN-γ表达阳性,甲状腺滤泡细胞Fas表达阳性,且Fas蛋白阳性甲状腺滤泡细胞常见于淋巴细胞浸润区,无淋巴细胞浸润的区域,较少见到甲状腺滤泡细胞Fas表达阳性。2.IFN-γ上调FRTL-5细胞Fas m RNA表达,且存在时间-剂量依赖关系。FRTL-5细胞Fas m RNA的表达量与IFN-γ刺激时间相关,24h、48h、72h组皆显著高于对照组,差异有统计学意义(`x±s分别为6.39±2.02,7.45±4.33,11.40±5.05,P<0.01);FRTL-5细胞Fas m RNA的表达量与IFN-γ刺激浓度相关,20ng/ml、40ng/ml、80ng/ml组皆显著高于对照组,差异有统计学意义(`x±s分别为4.01±1.48,10.53±1.54,3.62±2.22,P<0.01)。3.流式细胞术检测示未经IFN-γ刺激的FRTL-5细胞Fas蛋白阳性表达率为10.1%,随着IFN-γ的剂量的增加,FRTL-5细胞Fas蛋白阳性表达率逐渐增高,20ng/ml的IFN-γ刺激组FRTL-5细胞Fas蛋白阳性表达率为28.3%,40ng/ml刺激组Fas蛋白阳性表达率为30.0%,80ng/ml刺激组Fas蛋白阳性表达率为38.9%。结论:桥本甲状腺炎甲状腺组织浸润的淋巴细胞分泌的IFN-γ通过上调甲状腺细胞Fas的表达,导致甲状腺组织的凋亡,与HT患者的甲状腺功能减退可能相关。