波纹唇鱼(Cheilinus undulatus)属于大型的珊瑚礁暖水性鱼类之一。波纹唇鱼的肉质富含蛋白质、不饱和脂肪酸和多种微量元素,同时味道鲜美,这使得人们过度捕捞波纹唇鱼,一些国际组织已将波纹唇鱼列为濒危物种。为了保护和开发这一种濒危鱼类,我国将波纹唇鱼列为人工繁育对象,而人工繁育的难点在于雌雄比例失调,针对这个问题,本研究探讨波纹唇鱼性别调控机制,为规模化人工繁育波纹唇鱼奠定理论基础。P450芳香化酶由Cyp19al基因编码,是将睾酮转化为雌二醇的关键酶。鱼类的生殖腺原基具有雌性和雄性发展的双向潜力,芳香化酶通过调节雌、雄激素的比例进而参与调节鱼类的性别分化及性腺功能的维持。然而对于社会性反转鱼类的最初“开关”基因及后续调控通路却知之甚少。找到芳香化酶基因Cyp19al的上游调控因子,是顺藤摸瓜揭示这一过程的可行策略,因此本研究社会性礁栖鱼类波纹唇鱼的Cyp19al基因启动子入手开展相关研究。在硬骨鱼当中,存在性腺型Cypl9ala和脑型Cypl9alb两个芳香化酶基因。Cypl9ala与性别调控及性腺发育直接相关;Cypl9alb可能间接影响性别分化。本研究在实验室前期所获得的波纹唇鱼Cypl9ala与Cypl9alb基因cDNA的基础上采用Genome walking技术克隆基因的启动子;使用软件预测其可能的转录结合位点;然后将启动子插入到双荧光素酶表达载体中构建重组质粒;最后,采用双荧光素酶报告基因检测系统检测启动子活性。本研究获得了波纹唇鱼性腺型Cypl9ala和脑型Cyp19alb基因的启动子序列,长度分别为1119bp与1632bp。预测分析发现其序列上存在许多转录元件:CREB,SRY,Sox5,SRF,TFIID,等转录因子的结合位点以及糖皮质激素受体(GR),雄激素受体(AR),视黄酸受体(PAR),芳香受体(AhR)和视黄醇受体(PXR)等核受体的结合位点。在Cyp19alb启动子上预测到CpG甲基化结合位点及雌激素受体(ER),而Cyp19ala启动子都不具备。这些转录元件可能是波纹唇鱼芳香化酶基因的转录调控位点。启动子活性初步分析表明,不同浓度的雄激素能够使Cyp19ala启动子表达活性提高,而Cyp19alb则无明显变化。不同浓度的雌激素条件下,Cyp19alb启动子活性存在显著差异,这与其含有ER有关,而cyp19ala则无明显变化。本研究为进一步揭示波纹唇鱼芳香化酶基因表达的调控机制奠定基础。