巴西苏木素联合平阳霉素对人舌癌细胞株(Tca8113)生长的影响

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目的:观察平阳霉素及巴西苏木素体外对Tca8113细胞增殖及凋亡的影响,以及两者联合应用体外对Tca8113细胞增殖及凋亡的作用,为口腔鳞状细胞癌临床联合化疗提供新的思路与方法。方法:MTT法分别检测平阳霉素、巴西苏木素对Tca8113细胞增殖能力的影响;流式细胞术检测平阳霉素、巴西苏木素及两者联合后细胞凋亡率;实时荧光定量PCR检测凋亡基因caspase-3mRNA和caspase-9mRNA相对表达水平。结果:1、巴西苏木素具有抑制Tca8113增殖的作用,在恒定的同一浓度下,随时间的延长,对Tca8113细胞的抑制率越大,抑制作用越强;在同一时间下,随着浓度的增大,对Tca8113细胞的抑制率越大,抑制作用越强。根据浓度-抑制率曲线,72h的IC50为146ug/ml为巴西苏木素(150ug/ml)的最佳作用浓度。2、平阳霉素具有抑制Tca8113增殖的作用,在恒定的同一浓度下,随时间的延长,对Tca8113细胞的抑制率越大,抑制作用越强;在同一时间下,随着浓度的增大,对Tca8113细胞的抑制率越大,抑制作用越强。根据浓度-抑制率曲线,72h的IC50为16ug/ml为平阳霉素(10ug/m1)的最佳作用浓度。3、流式细胞术结果显示,用药72小时后空白对照组(A)、巴西苏木素组(B)、平阳霉素组(C)及联合组(D)的细胞凋亡百分率分别为:1.25±0.21、11.36±0.46、14.27±0.51与22.17±0.67,与A组相比,B、C、D组Tca8113细胞具有明显的凋亡趋势,其中D组Tca8113细胞凋亡百分率显著提高,高于B和C组(p<0.01)。4、RT-PCR结果显示,用药72小时后空白对照组(A)、巴西苏木素组(B)、平阳霉素组(C)及联合组(D)的caspase-3mRNA的相对表达量中B、C、D组明显高于对照组A组(p<0.05),D组明显高于B和C组(p<0.05),而B和C组无显著差异性(p>0.05);caspase-9mRNA的相对表达量分别为:B、C、D组明显高于对照组A组(p<0.05),D组明显高于B和C组(p<0.05),而B和C组无显著差异性(p>0.05)。结论:1、巴西苏木素具有显著抑制Tca8113细胞生长作用,在同一时间内,浓度与抑制作用呈正相关;在同一浓度时,时间与抑制作用呈正相关。2、平阳霉素具有显著抑制Tca8113细胞生长作用,在同一时间内,随浓度的增大,抑制作用增强;在同一浓度时,随着时间的延长,抑制作用亦增强。3、巴西苏木素与平阳霉素的联合应用具有较强的促进Tca8113细胞凋亡的作用。
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