论文部分内容阅读
目的:本研究主要探讨肝X受体(Liver X Receptors,LXRs)对LPS诱导RAW264.7小鼠巨噬细胞p65 NF-κB的影响,并进一步探讨其可能机制。方法:本实验我们采用RAW264.7细胞作为研究对象,以LPS诱导的RAW264.7细胞为炎症模型,观察LXRs配体预处理巨噬细胞对p65 NF-κB表达和多聚泛素化水平的影响。用蛋白质合成抑制剂亚胺环己酮(CHX)阻断p65 NF-κB蛋白的合成,分析LXR配体是否影响p65 NF-κB蛋白的稳定性。通过western blot和PCR技术观察LXRs配体对SOCS1基因和蛋白的表达情况。然后通过采用siRNA干扰技术进行细胞转染,沉默RAW264.7细胞内SOCS1表达后,观察LXRs配体对LPS诱导的巨噬细胞中SOCS1、p65 NF-κB蛋白表达以及p65 NF-κB多聚泛素化水平的影响。结果:LXRs配体预处理能够显著抑制LPS诱导的RAW264.7细胞中p65 NF-κB蛋白的表达,并且也能显著上调E3连接酶SOCS1mRNA和蛋白的表达。蛋白酶体抑制剂MG132阻断泛素化途径时,T0901317能够促进p65 NF-κB的泛素化和泛素化降解。SOCS1siRNA转染至RAW264.7细胞阻断SOCS1的表达,明显抑制T0901317诱导的p65 NF-κB泛素化和泛素化降解。结论:LXRs配体预处理能够明显抑制LPS诱导的RAW264.7细胞p65 NF-κB蛋白表达,这可能是LXRs通过SOCS1介导的泛素化途径下调p65 NF-κB水平。