二氧化硅(SiO2)诱导肝癌周围肝纤维化的实验研究

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目的:建立裸大鼠人肝癌原位移植模型,在移植模型的基础上建立选择性肝动脉插管模型;然后以二氧化硅行肝动脉灌注,观察灌注后肝癌周围纤维化病理结果以及肝脏肿瘤体积变化,探讨二氧化硅使肝癌周围纤维化的可能性。方法:采用人肝癌HepG2细胞株,开腹行肝左叶直接注射法制作裸大鼠人肝癌原位移植模型;2周后采用改良Lindell技术行裸大鼠人肝癌肝动脉插管。裸大鼠(n=30),随机分为3组。SiO2组(n=10),向肝动脉动内推注SiO2+超液化碘油+生理盐水合液0.1ml;碘油组(11=10),推注超液化碘油+生理盐水0.1ml;生理盐水(N S)组(n=10),推注生理盐水0.1ml。肝动脉插管灌注2月后处死裸大鼠,取下肝脏标本,测量肿瘤体积。应用HE染色观察组织形态改变,测量变性坏死及纤维细胞增生的面积。每只裸鼠取不同病变总面积作为结果,判断标准按不同病变总面积分成Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级。应用Masson染色法观察局部胶原纤维形成情况,并应用Qwin软件进行图像分析。结果:30只裸大鼠接种成功率100%(30/30)。插管成功率为93.3%(28/30)。灌注2月后肿瘤体积,SiO2组、碘油组、N S三组分别为395.82±48.60 mm3 514.72±34.91 mm3 643.64±43.85 mm3。SiO2组肿瘤体积最少,差异有统计池意义(P<0.01)。镜下观察,三组均可见肝癌周围肝脏变性坏死及纤维细胞增生,SiO2组变性坏死及纤维细胞增生面积最大(P<0.05),差异具有统计学意义。应用Masson染色法观测局部胶原纤维被染成绿色,SiO2组(12.46±1.84%)较碘油组(5.44±0.58%)和NS组(2.55±0.36%)显著增多,具有高度差异性(P<0.01)。结论:1.建立了裸大鼠人肝癌原位移植模型。2.在裸大鼠人肝癌原位移植模型的基础上,利用改良的Lindell插管技术能模拟临床肝癌介入超选择插管技术,适合于肝癌血管介入治疗的实验研究。3.二氧化硅经肝动脉灌注可以导致裸大鼠肝癌周围纤维化。
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