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目的: 1.探讨三化汤对局灶性脑缺血再灌注后reelin蛋白表达的影响 2.探讨三化汤对局灶性脑缺血再灌注后tau蛋白及其磷酸化表达的影响 3.探讨reelin蛋白与tau蛋白磷酸化的关系在三化汤对局灶性脑缺血再灌注后神经保护中的作用 方法:SD雄性大鼠随机分为三组:假手术组、模型组、三化汤10mg/kg·d组,每组据6h,1d,3d,7d,14d不同时间点分为五个亚组(均(n)=12)。参考Longa法制作大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,假手术组只分离血管不插线。三化汤组在手术前三天通过灌胃给药,假手术组及模型组给予等量生理盐水。MCAO术后2h进行神经功能缺损评分,筛选1-3分的作为成功模型,并在各时间点进行神经功能缺损评分。通过免疫组织化学(IHC)、蛋白免疫印迹(western blot)方法检测reelin蛋白、tau蛋白及其磷酸化的表达;实时荧光定量PCR(RT-FPCR)检测reelin蛋白及tau蛋白的mRNA的表达。 结果: 1.神经功能缺损评分:模型组与三化汤组比较,在缺血再灌注6h时,神经功能缺损评分未见明显差异(P>0.05);在缺血再灌注1d,3d,7d,14d时,有统计学差异(P<0.05)。 2.Reelin蛋白的表达:RT-FPCR及western blot的检测显示reelin蛋白在缺血再灌注后假手术组、模型组、三化汤组在各时间点未见明显差异(P>0.05)。 3.Tau蛋白的表达;western blot及RT-FPCR检测显示tau蛋白在缺血再灌注后假手术组、模型组、三化汤组在各时间点未见明显差异(P>0.05)。 4.Tau蛋白磷酸化的表达:western blot检测显示,与假手术组比较,模型组、三化汤组在缺血再灌注的各个时间点tau蛋白磷酸化的表达均有统计学差异(P<0.05)。模型组与三化汤组比较,在缺血再灌注6h时,tau蛋白磷酸化的表达无统计学差异(P>0.05);在1d,3d,7d,14d时有明显统计学差异(P<0.05)。 结论: 1.三化汤可以降低神经功能缺损评分,减少tau蛋白磷酸化的表达,表明三化汤对大鼠脑缺血再灌注损伤有神经保护作用,其保护机制可能是通过抑制tau蛋白的磷酸化表达而实现的。 2.大鼠脑缺血再灌注损伤后reelin蛋白和tau蛋白表达均未见明显变化,而tau蛋白磷酸化表达明显升高,未能发现tau蛋白磷酸化表达增加与reelin蛋白有关。