【摘 要】
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固相萃取技术是基于液-固色谱理论,主要通过固相萃取材料与目标分析物发生相互作用,从而选择性吸附目标分析物,实现目标分析物分离富集的样品前处理方法。但是固相萃取技术也存在局限性,如固相萃取柱结构简单、分析样品受限和萃取过程趋于“机械化”等,因此需要不断发展和完善固相萃取技术。微生物是自然界中种类最多、数量最多和繁殖能力最强的物种,其与外界环境进行物质交换和信息交流的过程可视为固相萃取过程中的吸附和洗
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固相萃取技术是基于液-固色谱理论,主要通过固相萃取材料与目标分析物发生相互作用,从而选择性吸附目标分析物,实现目标分析物分离富集的样品前处理方法。但是固相萃取技术也存在局限性,如固相萃取柱结构简单、分析样品受限和萃取过程趋于“机械化”等,因此需要不断发展和完善固相萃取技术。微生物是自然界中种类最多、数量最多和繁殖能力最强的物种,其与外界环境进行物质交换和信息交流的过程可视为固相萃取过程中的吸附和洗脱,若能将其发展成为常规的固相萃取材料,将会是极具发展潜力的研究方向。将微生物科学与分离科学有机地结合起来,对环境污染修复、微生物吸附剂和样品前处理的研究具有重要指导意义。本论文建立了一种以活细菌作为萃取吸附材料的新型固相萃取方法,对该方法进行了优化、评价和应用,最后对其吸附机理进行了探究,这为拓宽样品前处理的选择与应用提供理论基础。本论文具体研究内容主要包括以下三个部分:(1)本论文对活细菌固相萃取方法进行了开发,首先对新方法的实验参数进行了考察和优化(包括细菌生理状态、生长曲线、分析物溶剂、分析物初始浓度、细菌用量、孵育时间和萃取溶剂等),吸附效果得到显著改善。其次对该方法进行了方法学验证,结果表明以细菌作为萃取材料是可行的,该方法符合生物样品分析要求。(2)本论文对新方法的富集性、选择性进行了考察与评价,结果表明该方法对不同分析物有着不同的富集能力和选择能力,其中大肠杆菌对分析物扑尔敏具有高富集能力和强选择能力。同时将该方法应用于大鼠体内外血浆样品分析中,结果表明,与传统有机溶剂法相比,该方法能够分离富集痕量分析物。因此,将该方法应用于样品前处理中是可行的。(3)在上述工作的基础上,对其可能存在的萃取吸附机理进行了研究。结果表明,大肠杆菌与六种分析物均存在相互作用,且强度和类型不同。大肠杆菌细胞表面的多糖、蛋白质和磷脂等物质可能参与了吸附过程的第一阶段(被动吸附),其次,大肠杆菌细胞内部的核酸、蛋白质和核糖体等物质可能参与了吸附过程的第二阶段(主动吸附)。综上,将微生物科学与固相萃取技术相结合,发展的生物固相萃取新方法为微生物在样品前处理中的开发和应用提供了新思路新方向。
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