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研究目的：为了探寻足三里穴刺血对脑缺血再灌注损伤后神经细胞凋亡的影响,证实刺血法在治疗急性缺血性脑卒中方面的优越性。研究方法：(1)运用线栓法建立急性缺血性脑卒中模型：从颈总动脉插入颈内动脉,可逆性地阻断一侧大脑中动脉；在线栓2h后再行麻醉大鼠,回拉钓鱼线lcm左右,使其后退出大脑中动脉主干,解除栓塞,此时脑底动脉环开通实现再灌注,将SD大鼠随机分为六组；(2)应用神经症状行为学指标检测,说明局灶性脑缺血大鼠模型造模成功；应用TUNEL去观察缺血侧大脑细胞凋亡情况。(3)采用免疫组化法观察刺血前后SD大鼠海马区Caspase-3蛋白表达的变化。结果：1.HE染色结果可见：在光镜下观察,假手术对照组锥体细胞排列整齐紧密,细胞核大而圆,核仁清晰,间质无水肿,海马区神经元细胞形态正常,细胞核无固缩或溶解；脑缺血模型6H、24H组：缺血区出现锥体细胞的密度减少及大量神经元变性坏死,神经元纤维疏松,细胞变性水肿、肿胀,胞核碎裂、溶解等细胞坏死特征；刺血干预组：各治疗组大脑皮质锥体细胞及海马CA1区锥体细胞变性水肿减轻,缺血有所改变,可见到较完整的锥体细胞,加强了对神经细胞的保护作用。2. TUNEL去检测凋亡细胞结果：本实验正常神经细胞为染色较淡,可观察到极少量的凋亡细胞,呈散在分布。TUNEL阳性细胞形态学上表现为细胞表面皱缩,胞体缩小,胞浆浓缩,核固缩,染色质凝聚,呈棕黄色或黄褐色颗粒,表现出凋亡的特征。本实验中,假手术组可观察到极少量的凋亡细胞,呈散在分布。与假手术组相比,模型组于再灌注6h时缺血周围区凋亡细胞明显增多,且随缺血再灌注时间延长而逐渐增加,再灌注6h、24h,2时间点比较存在统计学差异。再灌注6h、24h组TUNEL阳性细胞数与假手术组比较均有显著(P<0.01)3.本实验结果表明,假手术对照组大鼠海马区可见胞浆微量黄染,着色较淡,呈弱阳性表达,脑缺血模型对照组在造模6H、24H后,Caspase-3在海马区阳性细胞的表达数目明显增多,与假手术对照组比较有显著性差异,P<0.01；脑缺血治疗6H组、24H组,Caspase-3胞浆、胞核少量黄染,在海马区阳性细胞的表达数目显著减少,与脑缺血模型组比较有显著性差异,P<0.01。结论：1.足三里刺血有减少神经行为学评分趋势,减少细胞凋亡,改善脑缺血,增加脑供血、供氧,对脑神经细胞起到保护作用。2.脑缺血再灌注损伤后,大鼠大脑海马区Caspase-3表达明显增加,以脑缺血模型大鼠增加明显,Caspase-3的过度表达,可导致细胞凋亡的加速。足三里刺血可减少Caspase-3的过度表达,作用明显。由此可见,刺血发挥作用的可能机制是抑制Caspase-3在级联反应中的作用,从而减轻细胞凋亡的发生,起到脑保护作用。