【摘 要】
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本论文开展了乳蛋白源抗菌肽的生物学研究:采用胰蛋白酶和胃蛋白酶作为工具酶,分别确立了乳蛋白经两种蛋白酶酶解产生抗菌肽的条件;酶解产物通过凝胶层析和离子交换层析进行分离
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本论文开展了乳蛋白源抗菌肽的生物学研究:采用胰蛋白酶和胃蛋白酶作为工具酶,分别确立了乳蛋白经两种蛋白酶酶解产生抗菌肽的条件;酶解产物通过凝胶层析和离子交换层析进行分离,获得了两个具有抗菌活性组分;并对两个抗菌肽制剂的抑菌作用和热稳定性进行具体的研究。通过正交试验和抗菌试验,综合水解效果和抑菌效果两方面考虑,确立了两种蛋白酶酶解乳蛋白产生抗菌肽的最佳水解条件为:胰蛋白酶水解乳蛋白条件为底物浓度10%,[E]/[S]为2.5%,反应温度50℃,pH值8.0,反应时间3h;胃蛋白酶水解乳蛋白条件为底物浓度10%,[E]/[S]为14%,反应温度37℃,pH值1.5,反应时间3h。选用Sephadex G-75和Sephadex G-15凝胶色谱,SP-Sepharose Fast Flow离子交换色谱来进行分离纯化乳蛋白的两种酶解产物,分别分离得到了较纯的具有抗菌活性的组分。对获得的两个抗菌组分进行微量稀释法抗菌试验,体外抑菌实验显示两个抗菌组分对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、链球菌、枯草杆菌、鸡巴氏杆菌、兔沙门氏菌这些革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均具有抑菌作用,表明乳蛋白酶解产生的抗菌肽有广谱抑菌活性。纯化后所得的两种抗菌肽组分的热稳定性实验表明,乳蛋白水解所得到的抗菌组分对热有很高的稳定性。
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