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研究的背景及目的: 登革病毒(Dengue virus,DV)是黄病毒科的单股正链RNA病毒,有4种血清型,均可以引起登革热(Classical dengue fever,DF)和登革出血热/登革休克综合征(Dengue hemorrhagic fever/Dengue shock syndrome,DHF/DSS),广泛流行于热带和亚热带地区。每年DF病例超过1亿,DHF病例约50万。WHO已将DHF/DSS、肝炎、疟疾、结核列为全球流行最严重的传染病。但DV的发病机理不明,临床治疗也主要是支持疗法和对症疗法对症为主。近年来,在世界范围内和我国南方以及东南亚,DHF/DSS的发病率有明显增加的趋势,可见登革病毒的感染已是严重的公共卫生问题。 关于DHF/DSS发病机制的看法,主要有三种:①抗体依赖增强(Antibody-dependent enhancement,ADE)理论:认为DV特异性IgG所引起的免疫增强效应导致出现DHF/DSS的病理变化;②病毒因素致病理论:认为病毒毒力或复制能力等因素是导致严重疾病的原因;③免疫病理反应理论:认为交叉反应性T细胞介导的细胞免疫损伤是DHF/DSS的主要病理机制。尽管传统的减毒活疫苗已进行多年的临床试验,但是到目前为止,仍没有安全有效的登革疫苗用于临床。因此,登革新型疫苗的研究极为迫切和重要。 DEN基因组为单股正链RNA,约11kb,从5’到3’端排列着3个结构基因(C、prM和E)和7个非结构基因(NS1、NS2A、NS2B、NS3、NS4A、NS4B和NS5),分别编码相应的蛋白。结构基因(占病基因组20%以上)影响着病毒的组装,进入宿主细胞和免疫反应。E蛋白是DV病毒体上包膜糖蛋白与最大的结构蛋白,由495个氨基酸组成,