【摘 要】
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研究背景:梅毒非特异性抗体作为梅毒实验诊断指标广泛应用于临床,但有关非特异性抗体的来源及其在梅毒螺旋体感染过程中的保护性尚不明确。研究目的:通过系列动物实验,探讨梅毒非特异性抗体的来源;明确梅毒螺旋体心磷脂抗原在膜上的位置;初筛心磷脂抗原结合的蛋白;评估非特异性抗体保护作用。研究方法:（1）采用免疫接种的方法,分别接种活的梅毒螺旋体和灭活的梅毒螺旋体,观察接种后免疫兔血清特异性抗体和非特异性抗体的
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研究背景:梅毒非特异性抗体作为梅毒实验诊断指标广泛应用于临床,但有关非特异性抗体的来源及其在梅毒螺旋体感染过程中的保护性尚不明确。研究目的:通过系列动物实验,探讨梅毒非特异性抗体的来源;明确梅毒螺旋体心磷脂抗原在膜上的位置;初筛心磷脂抗原结合的蛋白;评估非特异性抗体保护作用。研究方法:（1）采用免疫接种的方法,分别接种活的梅毒螺旋体和灭活的梅毒螺旋体,观察接种后免疫兔血清特异性抗体和非特异性抗体的产生情况,其中,灭活的梅毒螺旋体处理方法包括甲醛处理、热灭活处理和超声破碎处理,设定心磷脂抗原免疫兔为对照;（2）采用免疫接种的方法,接种经不同处理破坏外膜的梅毒螺旋体,观察破坏外膜的梅毒螺旋体接种后免疫兔血清特异性抗体和非特异性抗体的产生情况,其中,破坏梅毒螺旋体外膜的方法包括Triton X-100处理、反复离心和柠檬酸钠处理,设定热灭活梅毒螺旋体免疫兔为对照;（3）采用离子淌度质谱技术,初步筛选与梅毒螺旋体心磷脂抗原结合的蛋白的信息;（4）诱导新西兰兔产生非特异性抗体后,梅毒螺旋体攻毒试验,评估非特异性抗体对兔梅毒感染进程的影响,评价非特异性抗体保护性。研究结果:（1）经过灭活处理的梅毒螺旋体可以诱导实验兔产生低滴度的非特异性抗体,而活性梅毒螺旋体更快速地使实验兔产生高滴度的、连续的非特异性抗体（P<0.001）;心磷脂抗原单独不能诱导产生抗心磷脂抗体,与BSA蛋白结合后可以诱导产生抗心磷脂抗体;（2）采用TritonX-100处理和反复离心处理破坏梅毒螺旋体外膜后,螺旋体仍保留有外膜成分,免疫后的实验兔可以产生低滴度的非特异性抗体,而采用柠檬酸钠处理将螺旋体外膜去除干净,免疫后的实验兔不能产生非特异性抗体;（3）采用离子淌度质谱技术共筛选获得23种心磷脂抗原结合蛋白候选蛋白,主要集中在ATP结合蛋白、GTP结合蛋白、微管结合蛋白和丙酮酸激酶等;（4）实验兔经免疫产生高滴度的非特异性抗体后,接种梅毒螺旋体,其皮损炎症细胞的浸润程度增加,并延缓了皮损溃疡出现时间（P0.05）。研究结论:（1）梅毒螺旋体含有心磷脂抗原,可诱导机体产生非特异性抗体;梅毒螺旋体感染机体后产生的高滴度非特异性抗体是梅毒螺旋体本身心磷脂抗原,以及螺旋体感染机体后损伤宿主细胞释放的心磷脂抗原共同作用的结果,后者发挥主要作用;心磷脂抗原需与蛋白结合才具有免疫原性;（2）梅毒螺旋体的心磷脂抗原位于螺旋体外膜;（3）离子淌度质谱技术筛选获得23种心磷脂结合蛋白候选蛋白;（4）非特异性抗体在梅毒螺旋体感染过程中可一定程度上延迟皮损溃疡出现时间,但不具备保护作用。通过上述结果,本研究阐明梅毒螺旋体感染过程中非特异性抗体的来源和其是否具有保护性作用等临床问题,为正确理解和应用非特异性抗体的临床价值具有重要的意义。
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