乙醛脱氢酶1作为喉癌Hep-2细胞系肿瘤干细胞标志物的实验研究及初步临床分析

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目的探讨乙醛脱氢酶1(aldehyde dehydrogenase1,ALDH1)在人喉癌Hep-2细胞系中的表达,观察ALDH1不同亚群肿瘤细胞的体外生长特性。方法应用荧光细胞化学染色及流式细胞术,观察和检测喉癌Hep-2细胞系中的ALDH1的表达;应用流式分选术分离ALDH1br亚群细胞, MTT法检测ALDH1不同亚群细胞增殖能力,动态流式检测ALDH1br亚群体外分化能力。结果喉癌Hep-2细胞系中ALDH1呈不同程度表达,其中有2.9±0.6%的细胞ALDH1呈高表达;MTT法示ALDH1br亚群的增殖能力高于ALDH1low亚群和未分选细胞;在含血清的培养液中,经过6天培养,ALDH1br亚群细胞由最初分选后的94.2±3.8%下降至分选前水平。结论喉癌Hep-2细胞系中,ALDH1br亚群细胞比例较少,ALDH1br亚群细胞具有强的体外分化和增殖能力。目的检测ALDH1不同表达亚群细胞的体内成瘤能力,确立ALDH1为喉癌Hep-2细胞系肿瘤干细胞标志物。方法将分选后的各亚群细胞进行培养,HE染色观察不同亚群细胞的生长情况;流式细胞仪检测ALDH1br亚群细胞和ALDH1low亚群细胞的细胞周期分布情况;三组细胞以5×104数量级注入裸鼠肩项部皮下,观察各组的成瘤情况。结果分选后的各组细胞生长状态相似,具有肿瘤细胞基本生长形态;各组细胞的细胞周期分布无差异;ALDH1br亚群细胞的致瘤时间短,肿瘤生长速度快于其他两组,具有统计学差异(P<0.05)。结论ALDH1br亚群细胞与ALDH1low亚群细胞和未分选细胞相比,具有强的成瘤能力;ALDH1可以作为喉癌Hep-2细胞系肿瘤干细胞标志物。目的探讨乙醛脱氢酶1在喉癌组织中的表达及临床病理意义。方法采用免疫组化Elivision法对2004年1月2006年12月间我院收治的86例喉癌患者的喉癌组织及其正常喉组织进行ALDH1检测,结合临床病理特征进行相关性分析。结果ALDH1在喉正常组织中不表达或低表达,在喉癌组织中不同程度表达,其中高表达25例,ALDH1的表达与患者年龄、喉癌的部位、浸润范围、临床分期无明显相关性(P>0.05);有淋巴结转移患者ALDH1表达高于淋巴结阴性患者,具有统计学意义(P<0.05);5年生存率ALDH1阳性患者明显低于ALDH1阴性患者(P<0.05)。结论ALDH1在喉癌组织中的高表达与淋巴结转移有关,且可以作为喉癌预后的重要因素,对喉癌预后进行评价。
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