论文部分内容阅读
目的:评估隐丹参酮改善多囊卵巢综合征(Polycystic ovary syndrome,PCOS)模式动物高雄激素血症及糖代谢紊乱的疗效,并探讨其疗效的分子机制,为隐丹参酮用于临床PCOS的治疗提供科学依据。方法:1、随机选取12周龄蛋白激酶B2(Protein kinase Bβ,Akt2)基因缺失(Akt2-/-)纯合子129/C57BL/6雌性小鼠50只和其同窝出生的有完整Akt2基因(Akt2+/+)的野生型129/C57BL/6J小鼠25只,随机分组,分组情况如下:WT组(野生型空白组,n=25)、Akt KO组(纯合子对照组,n=25)、Akt KO-cry组(纯合子隐丹参酮组,n=25)2、Akt KO-cry组行中药隐丹参酮灌胃治疗(40mg/kg),WT组和Akt KO组均给予等体积生理盐水灌胃。每日晚8点禁食后,次日清晨8点灌胃,每日一次连续治疗2周。3、各组治疗结束后进行口服葡萄糖耐量试验(Oral glucose tolerance test,OGTT)(2mg/kg)。4、治疗结束后进行阴道涂片,于动情间期取材:称取各组小鼠体重、双侧卵巢重量、双侧子宫重量、性腺旁脂肪垫重量及腹股沟脂肪重量。5、血清置于-80℃冻存用于检测17-羟孕酮(17a-hydroxy progesterone,17-OHP)及胰岛素(Insulin,INS)水平。6、实时荧光定 量 聚合酶链反应(Quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)方法检测类固醇合成急性调节蛋白(Steroidogenic acute-regulatory protein,Star)、胆固醇侧链裂解酶(Cholesterol side-chain cleavage enzyme,CYP11)、17α-羟化酶(17alpha-hydroxylase,CYP17α1)及3β羟类固醇脱氢酶(3beta-hydroxysteroiddehydrogenase,3β-HSD)等分子mRNA的表达。结果:1、治疗结束后,与Akt KO组相比,Akt KO-cry组子宫帝脂肪重量明显降低(P<0.05)。卵巢、子宫、腹股沟旁脂肪重量有降低的趋势,但无显著差异。2、与WT组相比,Akt KO组17-OHP及INS水平明显升高(P<0.05);隐丹参酮治疗后Akt KO-cry组17-OHP及INS水平均明显降低(P<0.05)。3、与WT组相比,Akt KO组30min和60min血糖水平明显增高(P<0.05);隐丹参酮治疗后 Akt KO-cry组 60min血糖水平明显降低(P<0.05)。4、与WT组相比,Akt KO组小鼠卵巢组织中相关分子Star、CYP11a1、3β-HSD、CYP17a1mRNA 表达水平明显升高(P<0.05)。5、隐丹参酮干预治疗后,Akt KO-cry组3β-HSD mRNA水平明显降低(P<0.05)。结论:1、隐丹参酮可以显著降低Akt2基因缺失雌性小鼠卵巢雄激素水平。2、隐丹参酮可以降低Akt2基因缺失雌性小鼠增高的INS和血糖水平,具有INS增敏作用。3、隐丹参酮降低Akt2基因缺失雌性小鼠高雄激素水平的分子机制可能为调节甾体激素合成酶的表达。其改善糖代谢及INS增敏作用的分子机子有待进一步研究。