鸡新城疫病毒(NDV)是禽类新城疫(ND)的病原，ND的爆发给养禽业造成严重危害，是国际兽医卫生组织(OIE)规定的A类动物传染病，一旦爆发需要向OIE报告，疫区要实行严厉的封锁和贸易禁运。NDV是有囊膜的单股负链RNA病毒，基因组约为15kb，编码6类结构蛋白，即RNA指导的RNA聚合酶(L)、血凝素神经氨酸苷酶(HN)、融合蛋白(F)、基质蛋白(M)、磷酸蛋白(P)、和蛋白(N)。根据NDV对鸡的致病性分为3类，即弱毒株、中等毒力毒株及强毒株(v-NDV)。对v-NDV的诊断主要根据对1日龄雏鸡的脑内接种致病指数(ICPI)、对42日龄鸡静脉接种的致病指数(IVPI)和最小致死量致死鸡胚平均死亡时间(MDT)等生物学指征进行鉴定，往往需要1周甚至更长时间。而F蛋白的裂解位点氨基酸序列具有毒力特异性，中、强毒株的序列为RRQK(R)RF，而弱毒株为RR(K)QR(E)RL。OIE已将裂解位点的序列作为判定NDV毒力的标准。荧光定量RT-PCR(RRT-PCR)具有特异性好、灵敏度高、检测速度快、通量高等优点，目前已广泛用于包括NDV在内的多种疾病的快速诊断、基因表达水平的检测、转基因动植物产品检测等领域。由于养禽生产中普遍使用弱毒疫苗预防ND，因此，建立能检测中强毒力NDV的RRT-PCR具有重要意义。 RNA干涉(RNA interference，RNAi)是由双链RNA介导的、在mRNA水平关闭相应基因表达的基因阻断新技术，使基因功能研究方法取得重大革新。在多种哺乳动物细胞及小鼠等模式动物活体试验证明，小干扰RNA(siRNA)能有效抑制多种病毒的复制，有望成为病毒感染治疗的新技术。我国的ND疫情依然十分严重，目前尚无有效的治疗药物，迫切需要研究的治疗技术用于该病的防治。 本研究的目的是建立检测中强毒力NDV的Taqmen RRT-PCR及检测NDV NP基因的SYBR Green I RRT-PCR；建立在鸡胚成纤维细胞(CEF)中开展RNAi研究平