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目的探讨结肠癌中上皮钙粘素基因(CDH1)启动子甲基化对上皮钙粘素(E-cadherin)和β-连接素(β-catenin)表达的影响及其与临床病理特征的关系。方法采用甲基化特异性PCR (MSP)技术,检测68例结肠腺癌组织、癌旁组织及正常粘膜组织中CDH1基因启动子甲基化的状况。采用免疫组化法检测E-cadherin及β-catenin蛋白的表达；MSP、RT-PCR检测DNA甲基化抑制剂5-氮-2’脱氧胞苷(5-Aza-CdR)干预前后人结肠癌HT-29细胞株CDH1基因启动子甲基化状态及E-cadherin mRNA的改变,并运用免疫荧光标记及激光共聚焦观察E-cadherin和β-catenin在细胞内的表达及分布情况。结果癌旁组织及癌组织中CDH1启动子甲基化的阳性表达分别为32.4%、57.4%,正常组织均为阴性表达。组间比较有统计学意义。E-cadherin在正常组织、癌旁组织及腺癌组织中表达依次降低,分别为：92.6%、66.2%、44.1%。而β-catenin则出现了表达部位的改变,从主要表达于细胞膜变为主要表达于细胞质及细胞核。正常组织中β-catenin均表达于细胞膜上,无胞质/胞核表达,β-catenin在癌旁组织及癌组织中胞质/胞核表达在分别为29.4%和50.0%。CDH1基因启动子甲基化阳性率与E-cadherin表达则呈负相关(r=-0.312,P=0.01),与β-catenin胞质／胞核表达密切相关r=0.309,P=0.018)；E-cadherin与β-catenin胞质／胞核表达负相关(r=-0.296,P=0.014)。CDHl基因启动子甲基化及E-cadherin、β-catenin的异常表达均与结肠癌分化程度及转移密切相关(P<0.05)。HT-29细胞在用药前CDH1基因启动子甲基化扩增阳性,非甲基化扩增阴性,用5-Aza-CdR处理后CDH1基因启动子甲基化扩增阴性,非甲基化扩增阳性; 5-Aza-CdR处理前细胞RT-PCR不能扩增出E-cadherin mRNA特异性条带,5-Aza-CdR处理后则可检测到E-cadherin mRNA转录,且mRNA水平与药物的浓度呈正相关；5-Aza-CdR处理前细胞未见E-cadherin表达,β-catenin主要表达于细胞质及细胞核中,5-Aza-CdR处理后在细胞膜可见E-cadherin及β-catenin表达。且随着5-Aza-CdR诱导E-cadherin的表达,β-catenin在细胞膜的分布增加,而在细胞质及细胞核的分布则减少。免疫荧光双重染色显示β-catenin胞膜分布与E-cadherin一致。结论1.结肠癌中E-cadherin的蛋白表达下调及β-catenin胞质／胞核表达与CDH1基因启动子甲基化相关;2.CDH1基因启动子甲基化与性别、年龄、肿瘤大小及部位无关,但与结肠癌分化程度、淋巴结转移及远处转移密切相关；3.CDH1基因启动子甲基化可能是导致结肠癌E-cadherin表达缺失及β-catenin异位分布的重要因素；4.5-Aza-CdR可诱导结肠癌细胞E-cadherin及β-catenin膜分布增加,提示特异性甲基化抑制剂可能为肿瘤防治提供新的方法。