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猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type2, PCV2)被认为是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(Postweaning multisystemic wasting syndrome, PMWS)的主要病原。该病毒可侵入机体的免疫系统,引起免疫抑制反应。首先,采用PCR扩增技术,从新疆呼图壁某猪场病猪(疑似患有PMWS)的腹股沟淋巴结中检测到PCV2病毒DNA。对病料做匀浆处理后接种无PCV1污染的PK-15细胞,盲传5代后,用PCR方法仍然能够检测到PCV2核酸。应用间接免疫荧光方法从接毒细胞中观察到特异性的荧光反应,说明细胞中有PCV2病毒粒子存在。其次,参考PCV2的全基因组序列(GenBank中收录),设计并合成一对引物。对分离的PCV2全基因组进行克隆测序,测序结果分析表明：该病毒分离株基因组全长为1767bp,与PCV1参考毒株(gu371908)的核苷酸序列同源性为76.8%,与其他PCV2参考病毒分离株的同源性为94.1%-99.3%。将该毒株命名为XJ-105株。最后,参考PCV2的全基因组序列(GenBank中收录),设计并合成两对引物。通过PCR方法,用第一对引物从接种XJ-105病毒株的PK-15细胞中扩增获得PCV2全基因组,克隆入pMD Simple18-T载体中构建了质粒(T-PCV2)。然后将其作为模板,利用第二对引物,采用PCR定点突变的技术再扩增一个PCV2XJ-105株的全基因组,将其克隆入另一载体pBluescript Ⅱ SK(+),构建出质粒(K-PCV2),接着,将T-PCV2质粒中的PCV2全基因组连至突变后的PCV2全基因组的下游,构建出包含PCV2双基因组的重组质粒(K-2PCV2)。将获得的K-2PCV2转染至PK-15细胞,盲传五代后,利用RT-PCR和IFA方法检测,结果证实：本实验构建的PCV2感染性克隆在体外具有感染性。本研究从患PMWS病猪腹股沟淋巴结中成功分离出一株PCV2病毒,并对分离的病毒进行全基因组克隆与序列测定。分析生成的系统发生进化树,结果表明：不同PCV分离株在进化差异性上表现明显,在此基础上构建了PCV2感染性克隆。这为研究PCV2的流行和变异,探索PCV2的致病机理、复制机制及疫苗的研制奠定了基础。