本论文对纳豆菌的分离鉴定、液体发酵条件及抗菌物质的分离纯化进行了研究,研究内容主要包括三个方面:1纳豆菌的分离鉴定本论文从日本纳豆中分离的到了5株有较强抗菌作用的菌株,对其中抗菌作用最强的1株菌BN5进行了菌落形态、菌体形态及生理生化特性鉴定,鉴定为枯草芽孢杆菌属纳豆菌亚种纳豆菌(Bacillus subtilis subsp.natto),简称纳豆菌BN5(Bacillus natto BN5)。2纳豆菌液体发酵条件的研究通过单因素和响应面试验,对纳豆菌发酵条件进行了试验研究。使用Minitab 15软件进行数据分析和作图,研究了菌种生长因素和发酵条件因素对纳豆菌BN5生长量的影响。试验结果表明:BN5的最优培养条件为,温度34.4℃、发酵液pH6.8、装瓶量56.8 mL/200 mL、接种量2%、摇床转速180 r/min。3纳豆菌发酵液中抗菌物质的分离纯化用饱和硫酸铵沉淀纳豆菌BN5发酵液中的抗菌物质,其中硫酸铵饱和度为30%-70%时提取的粗蛋白具有较强的抑菌活性,当饱和度达到70%时提取的抗菌物质抑菌活性最强。采用了层析技术分离和纯化了纳豆菌BN5发酵液的抗菌粗蛋白,利用DEAE-52阴离子交换层析后得到3个蛋白质吸收峰,其中Ⅱ峰、Ⅲ峰对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌具有抑菌活性。将Ⅱ峰收集液过Sephadex G-50凝胶柱层析分离后得到2个吸收峰,其中Ⅳ峰、Ⅴ峰对肠杆菌和金黄色葡萄球菌具有抑菌活性。研究表明:Ⅴ峰对肠杆菌和金黄色葡萄球菌具有最强抑菌活性。