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枯草芽孢杆菌次级代谢产物多为小分子环状抗菌脂肽,这些环状抗菌脂肽具有抑菌谱广、低耐药性、无毒、可降解等优点,所以一直以来都被尝试应用于农业、畜牧业、医药业等,被视作绿色、安全的抗生素替代品。然而,抗菌脂肽的研究存在产量低、成本高等缺点,尤其有机试剂的使用使得抗菌脂肽无法工业化生产。本研究通过对实验室已保藏的枯草芽孢杆菌HS-A38及其诱变株mutHS-245和mutHS-301进行抗菌脂肽生产性能的比较,并进行抗菌脂肽产品制备,进一步对该产品进行特性分析。研究结果如下:(1)采用牛津杯法对本实验室已分离的枯草芽孢杆菌HS-A38原始菌及其诱变株mutHS-245和mutHS-301的发酵上清液进行抑菌活性检测。结果发现,枯草芽孢杆菌HS-A38和诱变株对副溶血弧菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞杆菌和灿烂弧菌均有抑菌活性,对灿烂弧菌抑菌性更强。再通过酸沉淀法、有机试剂萃取和旋转蒸发等步骤,从发酵上清液中制备抗菌脂肽产品。结果发现,诱变株mutHS-245和mutHS-301的抗菌脂肽产量比原始菌株分别提高了26.0%和31.3%。(2)经过Tricine-SDS-PAGE电泳分析发现,该抗菌脂肽产品分子量小于3.3 kDa,无其它杂质。通过薄层层析分析可知,共分离出三个荧光斑点,比移值(Rf)分别为0.26、0.37和0.79。同时反相高效液相色谱中在23~26 min、27~31 min和33~39 min也获得了A、B、C三组峰团。根据峰面积归一化法求得,A峰团分别占各菌株总面积为48.69%(原始菌HS-A38)、50.38%(mutHS-245)和50.99%(mutHS-301)。(3)利用喷雾干燥法将发酵上清液直接喷雾干燥得到抗菌脂肽产品,它可作为饲料添加剂用于水产动物及家禽的养殖饲料中。以诱变株mutHS-245为出发菌株,比较了使用新型发酵培养基与原始发酵培养基抗菌脂肽产量的影响。结果发现,该诱变株利用新型发酵培养基发酵生产抗菌脂肽的产率比原始发酵培养基提高了17.9%,达到了54.72 g/L。进一步研究发现,诱变株mutHS-301利用新型发酵培养基生产抗菌脂肽,其产量达到了60.45 g/L,结果得到诱变株mutHS-245和mutHS-301比HS-A38抗菌脂肽产率分别提高了11.0%和19.5%。另外,经过喷雾干燥工艺优化,当以5%玉米淀粉为保护剂时,抗菌脂肽制剂产率达到了44.90 g/L,水分含量为0.11%。当抗菌脂肽产品浓度为20 mg/mL时,对金黄色葡萄球菌和副溶血弧菌有显著的抑制作用。(4)为了验证抗菌脂肽做为饲料添加剂的可能性,进行了抗菌脂肽特性分析实验。结果发现,当温度在25~80℃时,抗菌脂肽产品抑菌活性几乎不变,并可耐受强酸强碱环境,具有良好的热稳定性和pH稳定性。经胰蛋白酶和胃蛋白酶作用后,该抗菌脂肽对金黄色葡萄球菌和灿烂弧菌的抑菌活性降低不显著,说明该产品对动物肠胃的蛋白酶不敏感,这对进一步开发该抗菌脂肽作为饲料添加剂非常有利。