论文部分内容阅读
目的:探讨肠道硫化氢（Hydrogen Sulfide,H2S）合成酶胱硫醚-γ-裂解酶（cystathionine-γ-lyase,CSE）与糖尿病（diabetes mellitus,DM）大鼠近端结肠动力的关系。方法:实验分为对照组（NC）组（n=10）和DM组（n=40）,DM组一次性腹腔注射1%链脲佐菌素（streptozocin,STZ）65 mg/kg,建立1型DM模型,尾静脉取血测血糖大于16.7mmol/L为造模成功,观察大鼠的一般情况。注药第10天将10只DM大鼠和10只NC大鼠处死作为基线水平测试,进行下一步实验。其他30只DM大鼠再进一步分组为:DM+空白组（n=10）、DM+生理盐水（NS）组（n=10）、DM+炔丙基甘氨酸（DL-propargylglycine,PAG）组（n=10）。DM+PAG组腹腔注射50mg/（Kg.d）PAG,DM+NS组注射50ml/（Kg.d）9%生理盐水,DM+空白组不做任何处理,连续注射15天,处死后进行下一步实验。制作结肠平滑肌纵行肌（longitudinal muscle,LM）条,使用生物机能实验系统记录每组LM肌条自发性收缩活性;分别采用免疫组化及双重免疫荧光的方法观察结肠全层标本及MP中CSE分布;采用Western blot方法观察肠道组织（去粘膜及粘膜下层）CSE的表达。用Spearman相关分析分析结肠动力与CSE表达相关性。结果:DM组近端结肠肌条收缩活性均低于NC组（p<0.05）,DM+PAG组近端结肠收缩活性均高于DM+NS组和DM+空白组（p<0.05）;CSE在平滑肌细胞及肌间神经元细胞强表达,在粘膜、粘膜下层、粘膜下神经丛弥散分布;CSE在大鼠肌间神经元细胞核中分布,但CSE阳性神经元所占MP比例无差异（p>0.05）;DM组大鼠结肠（去除粘膜及粘膜下层后）CSE较NC组表达上调（p<0.05）,DM+PAG组CSE表达较DM+NS组和DM+空白组降低（p<0.05）;NC组和DM组LM肌电生理与CSE表达成负相关（r=-0.782,p<0.05）;DM+NS组和DM+组LM肌电生理与CSE表达成负相关（r=-0.747,p<0.05）。结论:CSE表达上调可能是DM大鼠近端结肠运动减退的原因之一。