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目的:比较PGD210转染的DC与未经转染的DC,刺激T细胞诱发免疫应答,有效激发T细胞并杀伤K562细胞的功能.编码肿瘤特异性抗原(TSA)的基因PGD210导入DC的方法,为将来制成PGD210转染DC疫苗用来治疗慢性髓细胞白血病作一个前期的初步研究.方法:①用Dailey教授馈赠的PGD210质粒转入由DH5α摇菌后制备成的感受态细胞,经少量提取的质粒分别进行酶切鉴定和PCR鉴定的方法证实为PGD210质粒,然后对其进行大量抽提.②用电转染的方法将大量抽提的PGD210质粒转入PBMNC诱生法制成的DC.用EGFP荧光质粒作为同等条件电转染的对照,并用RT-PCR鉴定PGD210质粒转入DC后转录的mRNA产物,证实电转染成功.③用带有PGD210质粒的DC与未经转染的DC,分别刺激T细胞,再用流式细胞仪PI染色法比较杀伤K562细胞的功能.结果:①酶切鉴定和PCR鉴定的方法均证实为PGD210质粒.②EGFP荧光质粒作为同等条件电转染的对照和RT-PCR鉴定均证实PGD210质粒通过电转染转入DC.③PGD210转染的DC刺激T细胞(5:1,10:1,20:1)杀伤K562细胞的百分比分别是(26.1﹪,32.5﹪,39.7﹪),未经转染的DC刺激T细胞(5:1,10:1,20:1)杀伤K562细胞的百分比分别是(4.8﹪,14.4﹪,27.2﹪),spss检测二者值比较有统计学差异.结论:PGD210转染的DC刺激T细胞诱发免疫应答,有效激发T细胞并杀伤K562细胞的功能强于未经转染的DC.