前言 进行性糖基化终末产物(advanced glycation endproducts，AGEs)是还原糖与蛋白质等物质的氨基非酶共价结合形成的不稳定的Schiff硷，随后Schiff硷发生化学重排，形成稳定的可逆的糖蛋白结合物，即Amadori产物。然后降解的产物经过重排，脱羧、聚合、以及交联等复杂的反应最终形成进行性糖基化终末产物(advanced glycation endproducts，AGEs)。在不同组织中AGEs的聚集可以导致糖尿病的各种慢性并发症。无论是大血管并发症还是微血管并发症。由此引起2型糖尿病的高致残率及高致死率。AGEs作为一组复合物，具有各种结构特征及成分包括羧甲基赖氨酸(CML)、吡咯素(pyrraline)、戊糖甙素(pentosidine)等。糖化蛋白质的增多与2型糖尿病的并发症有着密切的关系。有关进行性糖化终末产物在长期糖尿病并发症中的致病作用，已有很多报道，通过药物或其它手段减少它的形成，可能会减缓并发症的进程。因此，将AGEs作为观察疗效的一个指标具有一定的意义，另有实验证明，Hb-AGE可能比HbA Ⅰc更好的反映血糖的控制状况，是一个可提供长期血糖控制的较好指标。但是还未见有关血清AGEs水平、HbA Ⅰc、血脂、尿微量白蛋白、血糖水平在糖尿病慢性并发症之间关系的研究报告。酶联免疫吸附法检测AGEs、免疫比浊法检测HbA Ⅰc及酶学法测定血脂、血糖、肾功能及双光径免疫分析法测定尿微量白蛋白。国外系列研究表明AGEs通过趋化与活化转化生长因子(TGF)、促进细胞因子释放和灭活一氧化氮(NO)等多种机制参与Alzheimer病、动脉粥样硬化、透析相关淀粉样病、高脂血症及糖尿病(DM)肾病、视网膜病变和神经病变等诸多疾病的发病过程。在2DM肾病患者及同年龄正常人检测血清AGEs水平、并结合年龄、血肌酐和血糖状态、血糖化血红蛋白、尿微量白蛋白进行分析，以期为进一步研究AGEs在衰老，DM和动脉粥样硬化中作用。 材料和方法 一、对象 1.正常人:120例，为2001年上半年在我院接受常规体检的人群，其中男85例、女35例。血清肌醉(Scr)与空腹、餐后2小时血糖正常，无糖尿病及肾脏病史。按不同年龄分为4组:A组鉴35岁，B组35一50岁，c组50-65岁，D组多65岁，每组各30人。 2.2型DM肾病患者:按时间顺序选自2001年l月至2002年12月底在我院肾脏科、内分泌科和老年科住院明确诊断并留有血清标本的2型DM肾病患者33例，所有患者均符合WHO诊断标准。男22例，女11例，年龄(61 .5土7.5)岁(50一80岁)，DM病程为(6.5，7.3)年，有8例患者scr>133.05协m0FL(227.37，%.34)卿OFL。其中17例在肾脏科住院并有完整的临床与病理资料。 二、血清AGEs检测{采用EllsA，由于AGE。存在共同的抗原决定簇，因此可以用单一AGE修饰蛋白的抗体检测总AGEs。在多种AGE修饰蛋白在抗AGERNase抗体能够非选择性地识别所有AGE复合物，但与非AGE修饰的蛋白及A浏adori物质不起反应。纯化AGE一牛血清白蛋白(BSA)(AGE一Ag)和兔抗人子，A GE一RNase多克隆抗体(AGE一Ab)购于日本和光纯药株式会社。 标准曲线及标准方程的建立:3m扩LAGE一Ag 100闪包被%孔板 (pHg .6碳酸氢盐缓冲液)，37℃2小时，4℃过夜;封闭l小时(封闭液0.01~心L PBs一1%BsA，巧O醉)，洗3次;第三步加人不同浓度标准AGE- Ag(分别为100、10、8、4、2、l、0.lm扩L)和AGE一灿各50闪(1:l以刃)，同时设总对照(不加标准AGE‘’Ag)和空白对照(不加AGE一Ab)，室温孵育2 小时，振荡，洗3次;第四步加AKP一羊抗兔19(1:4仪犯，519叮a)100讨，37℃ 孵育1小时，洗6次，稀释液均为0.01nnnoFL PBS一0.5%知een20一2%山 羊血清，清洗液均为0.01mmol/L PBS一0.5%Tween20，均设复孔。最后 pNPP底物(519叮a)显色，在405nm波长下读取A值，至总对照A值在1.2 一1.5之间，计算标准AGE一AgA比值二(标准A405一空白A绷)/(总A拐 一空白A405)。各标准浓度AGE一掩A比值与其浓度之间关系模拟方程y 二1/(1十axb)，拟合得方程y二1/(1+0.1170x0·服)。经统计学检验R二 0.9915、RZ二0.9530，P<0.01，表明通过此方程，标准A幼值能反映其 AGEs水平。 血清 AGEs检测:一70℃冰箱保存的2型DM肾病患者血清标本和正 常人群新鲜血清经1:5稀释后进行AGEs检测，均设复孔，取其平均A值代人上述方程计算出各标本AGES水平，批间差异8%一12%。 三、统计学处理 各组间性别分布采用多个样本率犷检验，正常人血清AGEs水平采用F一q检验，33例50岁以上的2型DM肾病患者血清AGES与年龄、SCr和血清E山A IC之间关系采用多元逐步线性回归分析，其余采用t检验。除多元逐步线性回归分析以p<0.1为差异显著外，其余均以p<0.05为差异显著。所有统计学处理应用S代治10，0软件包统计。结果’ 一、不同年龄组正常人群血清AGEs水平在四组不同年龄段正常人群中性别无统计学差异。血清AGEs水平在正常人群不同年龄组中存在明显差异，随年龄增长而增加。进一步两两比较表明在A组与B、C、D组及B组与C、D组之间血清AGEs水平存在着明显差异。但在C、D二组间差异无显著性。(表1)表1不同