【摘 要】
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猪附红细胞体病(Eperythrozoonosis, EH)是由猪附红细胞体引起的以贫血、发热、黄疸为主要特性的一种人兽共患病,该病在我国多个地方流行爆发,给养殖业带来较大的经济损失。
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猪附红细胞体病(Eperythrozoonosis, EH)是由猪附红细胞体引起的以贫血、发热、黄疸为主要特性的一种人兽共患病,该病在我国多个地方流行爆发,给养殖业带来较大的经济损失。本试验根据广东株附红细胞体的部分基因序列(AY492086)设计一对引物,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增出一条与目的片段大小一致的约为651bp的基因片段,将三个XXF01、XXF02和XXF03扩增产物测序后进行分析,结果表明所测样品为猪附细胞体特异性基因,与广东株猪附红细胞体基因序列(AY492086)同源性为99.9%。利用设计的引物对临床血液样本进行检测,阳性检出率为91.7%,表明该引物可以作为检测猪附红细胞体的特异性引物来使用。在RPMI-1640、DMEM、DMEM-F12三种培养基中分别加入不同比例的新生牛血清进行猪附红细胞体的体外培养效果比较,以确定最佳培养基和新生牛血清的添加比例。并依照确定的培养条件进行猪附红细胞体体外感染鸡、兔、猪红细胞的试验,结果表明:RPMI-1640培养液中添加40%新牛血清其感染率最高。在猪附红细胞体体外感染健康鸡、兔、猪动物红细胞的试验发现,鸡感染率较低,为6.4%,将培养温度设定为38.5℃时鸡红细胞感染率有所提高。通过扫描电镜对猪附红细胞体进行形态学观察,分离、培养鸡骨髓间充质干细胞,研究附红细胞体在骨髓间充质干细胞上寄生的可能性,为进一步研究附红细胞体的感染机制奠定基础。
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