三种食菌小蠹共生真菌的多样性及分子鉴定研究

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食菌小蠹是一类在生态上和经济上都很重要的林业害虫,寄主范围非常广泛,包括多种针叶树和阔叶树,该类小蠹对亚热带及热带林业造成了巨大的危害和安全隐患。共生真菌为食菌小蠹的生长繁殖提供了必需的食物,同时有的种类是树木病原菌,能够削弱寄主抗性或者使树木致病。本项目主要目的是采用现代分子生物学和传统微生物学相结合的方法对食菌小蠹共生真菌进行深入研究:包括食菌小蠹共生真菌种类资源的多样性、真菌的形态学与分子鉴定,优势种群Fusarium属的DNA条形码的筛选与评价三个方向进行研究。本实验于2017-2018年。从广东省广州地区、江西赣州地区、福建福州等地采集被食菌小蠹危害的寄主树木及虫体样品共93株,经分离、纯化,共获得纯系真菌238株。经形态学初步鉴定,采集到的小蠹虫种类为三种,包括Xylosandrus cf.brives,X.discolor和Platypus sp.。通过扩增共生真菌的ITS基因片段序列,并在Genbank数据库中进行比对,共初步得到21个属,包括:Byssochlamys、Curvularia、Cyberlindnera、Cytospora、Diaporthe、Diplodia、Fusarium、Geosmithia、Lasiodiplodia、Massarina、Ophiostoma、Paraconiothyrium、Penicillium、Phaeoacremonium、Phialemoniopsis、Phoma、Prosthecium、Raffaelea、Schizophyllum、Sporothrix、Verticillium。其中Fusarium属和Geosmithia为广布优势种,Fusarium属真菌最多占所有种属的35%。对Fusarium属真菌进行深入的分子鉴定研究,基于ITS/TEF/TUB多基因片段序列的系统发育分析,最终鉴定了Fusarium属为5个种,包括2个已知种(F.ambrosium和F.decemcelluare)和3个疑似新种,并对Fusarium属的所有发现的种类进行形态学观察与描述。上述三条DNA条形码,TEF基因对于所分离到Fusarium属的真菌种间识别率最高,建议用作Fusarium solani complex的DNA条形码基因。通过对广州及周边地区三种食菌小蠹共生真菌的研究,初步明确了该地区部分食菌小蠹共生真菌的物种多样性和优势种类,为小蠹及共生真菌病害的检疫、监测及防治工作提供理论基础和探究思路。
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