菲降解菌的筛选及其对医药中间体的催化转化

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多环芳烃是环境致癌物,在1000多种环境致癌物中占三分之一以上。它可以随食物链富集引起人体致癌致畸性突变。多环芳烃的修复方法有物理法、化学法和生物法。由于微生物修复法具有高效清洁的特点,越来越受到重视。本文以长期被有机物污染的河泥作为原始菌源,驯化筛选出了能同时代谢多环芳烃和有机磷农药的高效降解菌。菌株能代谢的有机磷农药有OP-DDT、PP-DDE、PP-DDD、PP-DDT、甲基对硫磷、对硫磷。实验研究了菌株的降解机理、降解体系优化以及对医药中间体催化转化。菌株降解机理方面,实验采用了GC-MS分析法及代谢中间产物降解实验确定了Bacillus. SW的菲降解途径,发现实验菌株降解菲的过程中可以从菲的3,4位碳及9,10位碳开环,具有两条降解途径。体系优化方面,实验确定了一些新方法,改变细胞膜通透性能使菌株对菲的降解率能提高8%。外加添加剂麦芽糖、吐温80以及甘油能使菲的降解率分别提高25%、18%和43.5%。由于实验菌株降解菲的经由邻苯二甲酸途径,实验引进了水杨酸途径的假单胞菌进行联合降解,在接种量为1:1,添加时间间隔为8天的条件下,菲的降解效率提高46.5%,至此得到了一个菲降解的优势菌群。实验将筛选的菌株进行两两融合,得到一株菲降解超级菌,降解率比单菌提高35%。医药中间体全细胞催化转化方面,实验完成了全细胞的小分子加羟反应,实验菌株能将水杨酸转化为龙胆酸,找到了一个合理的酶阻断剂SDS,将转化反应很好的控制在了加羟步骤。
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