皮肤创伤是小动物临床实践中常见的外科疾病,其在愈合过程中常伴随着炎症和氧化应激等反应,有时容易造成创面不愈或者延迟愈合的现象。现有研究表明氢分子具有抗氧化、抗炎、抗凋亡的生物学作用。因此,本实验拟通过对皮肤创伤模型犬口服富氢水的实验方法,来评价富氢水促进犬皮肤创面愈合的效果。12只比格犬随机分为对照组和实验组(n=6)。实验组2次/日定时饮用富氢水,对照组饮用蒸馏水。在犬背部中线两侧建立皮肤组织全层创伤模型,每侧4个直径为15mm的圆形创面,共8个创面。造模后,每天观察创面的情况,记录创面出血、水肿、渗出、结痂和愈合情况,并确定创面最终的愈合时间。分别在0d、3d、7d、14d、21d和28d拍照记录创面情况,使用Image J软件分析图像并测量创面面积,计算创面愈合率。观察创面皮肤组织病理学切片中纤维母细胞、炎性细胞、新生血管数和上皮化厚度;测定创面皮肤组织匀浆中丙二醛(MDA)和过氧化物歧化酶(SOD)的含量;测定创面皮肤组织中红系衍生核相关因子-2(Nrf-2)、血红素氧合酶l(HO-1)、醌氧化还原酶1(NQO1)、血管内皮生长因子(VEGF)和血小板衍生因子(PDGF)的基因表达量。对照组创伤愈合时间为21±0.75d,实验组创伤愈合时间为18±0.62d,明显小于对照组(P<0.05)。同时,在3d和7d实验组平均愈合率明显高于对照组(P<0.01)。根据创面皮肤组织病理学切片观察的结果显示,在第7d,实验组的新生血管的平均数明显高于对照组(P<0.01)。第21d,实验组的血管基本消退,低于对照组(P<0.05)。第14d,实验组表皮的平均厚度小于对照组(P<0.05),第21d实验组表皮的平均厚度明显小于对照组(P<0.01)。测定创面皮肤组织匀浆中MDA和SOD含量的结果显示,第7d时,对照组MDA含量高于实验组(P<0.05)。第14d,对照组MDA含量明显高于实验组(P<0.01)。在第7d、21d和28 d时,对照组皮肤组织中SOD的含量均低于实验组(P<0.05)。通过实时荧光定量PCR检测结果可知,第7d和21d实验组Nrf-2基因的表达量显著升高,实验组明显高于对照组(P<0.01)。第7d和14d,实验组HO-1基因的表达量显著升高,实验组明显高于对照组(P<0.01)。第7d和21d时,实验组NQO1基因的表达量明显高于对照组(P<0.01)。第7d和14d时,实验组VEGF和PDGF基因的表达量均升高且实验组明显高于对照组(P<0.01)。实验结果表明,富氢水在创面愈合过程中可以通过降低炎症反应,增加新生血管数,加速创面上皮化,加快创面愈合速率,缩短创面愈合时间,从而达到加快创伤愈合的目的。