氯痤疮患者皮肤信号转导途径和角化细胞增殖分化标志分子异常表达的研究

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目的:二噁英(Dioxins)是有机氯化合物的生产合成、废弃物的燃烧处理等过程中产生的一类非目的性化学物质的总称,是环境中毒性极强的持续性多氯代芳香烃化合物。二噁英具有广泛的毒性作用和生物学效应,包括对免疫、生殖、发育等毒害作用,并可造成子代畸形,同时还可能具有潜在致癌的特性。其中,氯痤疮(chloracne)被认为是人类暴露于高浓度二噁英的可靠指标。本研究以患有氯痤疮的男性工人作为研究对象,取其患处皮损组织活检标本作为生物标本,检测磷酸化表皮生长因子受体(p-EGFR)和磷酸化丝裂原激活蛋白激酶(p-MAPK)蛋白、角蛋白17(CK17)mRNA和角质形成细胞转谷酰胺酶(TGk)mRNA、CK17和TGk蛋白在氯痤疮患者和对照人群皮肤中表达分布的情况,为二噁英诱发氯痤疮发病机制的研究提供理论依据。方法:本次实验以天津市某化工厂生产五氯酚钠车间患有氯痤疮的男性作业工人为患病组,对照人群为天津市区无职业接触史的正常人群。遵照“最小创伤”的原则,采取研究对象患病处直径为0.5cm,深度为0.2cm的皮肤,对照人群于相应部位取同样大小的皮肤,采用免疫荧光方法,检测p-EGFR和p-MAPK蛋白表达的情况;采用mRNA荧光原位杂交法与激光扫描共聚焦显微镜结合,测定CK17mRNA和TGkmRNA在表皮层表达分布的改变,并采用免疫组织化学方法测定CK17和TGk蛋白在氯痤疮患者和对照人群皮肤中表达分布的情况。结果:1资料基本特征描述:本研究调查了氯痤疮组12人,平均年龄(52.08±7.62)岁;对照组12人,平均年龄(51.42±5.30)岁。两组人群在年龄、身体质量指数(BMI),吸烟和饮酒状况的分布不存在差别,均衡性良好。2 p-EGFR和p-MAPK蛋白表达情况:氯痤疮组中p-EGFR和p-MAPK均呈阳性表达,p-EGFR主要分布在细胞膜和细胞浆,尤以细胞膜附近最为明显;p-MAPK的阳性信号主要呈核浆型。对照组中均阴性。3 CK17和TGk基因和蛋白两个水平在表皮层表达分布情况:CK17 mRNA和CK17蛋白在正常皮肤各层染色阴性,在氯痤疮患者皮肤组织中均有表达,阳性表达主要在棘细胞层。TGk mRNA和TGk蛋白在对照组仅见颗粒层阳性,其它各层染色阴性;在氯痤疮组人群中,TGk mRNA和TGk蛋白染色从皮损颗粒层向棘细胞层扩散延伸,染色强度明显增强。结论:氯痤疮患者皮肤组织中EGFR和MAPK呈异常活化状态,表明它们很可能参与了氯痤疮表皮细胞过度增殖的调节。同时氯痤疮患者表皮CK17和TGk基因和蛋白两个水平的异常表达,表明二噁英有可能干扰细胞正常的增殖和分化,从而导致氯痤疮的发生发展。
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