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目的:通过中药Ⅱ号洗液湿敷对小鼠急性湿疹模型的皮肤组织炎症及降钙素相关基因肽(CGRP)影响的实验研究,探讨其治疗急性湿疹的机理。
方法:实验研究实验1.取昆明种远交系健康小白鼠40只,体重(2 0±2 g),雌雄比 1:1,随机分4组,每组10只,分别为空白组、模型对照组、3%硼酸组、中药Ⅱ号洗液组。空白组不作做任何处理,模型对照组、3%硼酸组、中药Ⅱ号洗液组均采用2,4二硝基氟苯(DNFB)造模。用丙酮、橄榄油(4:1)为溶剂,稀释2,4二硝基氟苯为0.2%及0.5%溶液备用。小鼠背部脱毛,面积为2×2cm2,在脱毛范围内均匀涂布0.5%DNFB,每天1次,连续2天,第6天进行激发:在三组小鼠左右耳背面涂抹0.2%DNFB。激发后72 h,将硼酸组、中药组分别外用3﹪硼酸、中药Ⅱ号洗液浸湿无菌纱布,胶带固定湿敷小鼠两耳双侧面,每天2次,每次30min,连续10天,模型对照组不作处理。于停药后24h用颈椎脱臼法处死小鼠,测四组小鼠:(1)左耳厚度差:用千分尺测定耳中部厚度,计算左耳诱发后厚度差(S1)。(2)耳质量差:测定厚度后以打孔器(8mm)取耳中部组织块,分析天平测质量,计算左耳组织块的质量差(S2)。比较各组数值,结果进行数据分析。实验2.真皮炎性细胞计数:实验方法同实验(1),取各组小块左耳组织,石蜡包埋切片,制成常规苏木素—伊红(HE)染色,分别计数10个高倍视野(HPF)淋巴细胞,取其平均值,计算出各组平均值。实验3小鼠右耳降钙素相关基因肽测试实验方法同实验(1),切下各组小鼠右耳,天平测量质量,按比例加入冷冰醋酸液0.5ml,100℃水浴10分钟,入组织匀浆机匀浆3分钟,至见不到颗粒状物,将匀浆液移入离心管中,离心机3000转∕分,离心3分钟,取上清液移入洁净瓶内,滴入ELISA试剂盒,移入酶标仪测定降钙素相关基因肽含量。
结果:1.中药Ⅱ号洗液组在左耳肿胀度均比模型对照组、硼酸组小(p<0.05);2.中药Ⅱ号洗液组抑制小鼠真炎性细胞细胞浸润的作用明显优于硼酸组(p<0.05);3.中药Ⅱ号洗液组对模型小鼠局部组织CGRP的增加作用明显优于硼酸组(p<0.05)。
结论:中药Ⅱ号洗液组治疗湿疹优于对照组,其治疗湿疹机理可能与抑制炎性细胞浸润和提高降钙素相关基因肽有关。