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目的由于机体在正常状态下与病理状态下对药物的吸收不同,本文采用开心散给予 AD模型大鼠进行干预,研究在疾病状态下的 AD 模型大鼠口服开心散后的血中移行成分,从而阐明开心散防治阿尔兹海默症的体内直接作用物质,为进一步研究开心散防治阿尔兹海默症的药效物质基础及发现治疗AD新的前体化合物提供依据。方法依照文献采用灌胃 AlCl3联合腹腔注射 D-gal 连续进行105d复制AD大鼠模型,以行为学、组织病理学为指标,评价AD大鼠模型,并给予开心散于AD模型大鼠进行干预研究;在开心散防治 AD有效性的条件下,基于中药血清药物化学的理论和方法,运用UPLC-HDMS/MS技术平台对AD模型大鼠口服开心散后的血中移行成分进行分析。通过直观比较和模式识别多变数据分析,鉴定开心散给予 AD大鼠干预后主要血中移行成分及其代谢产物。结果1.AD大鼠模型复制及评价利用AlCl3联合D-gal复制AD大鼠模型。行为学测试结果发现,与空白组比较,模型组大鼠学习时间明显延长(P<0.05或P<0.01),穿越平台次数减少(P<0.01);同时结合组织病理和免疫组化指标观察,结果为AD模型大鼠大脑皮层及海马C A3区神经元细胞数目减少,包浆染色变深,并可见变性的神经元细胞,胶质细胞增多,Aβ1-40表达显著升高,表明大鼠阿尔兹海默症模型复制成功。2.开心散对AD大鼠的干预作用研究在大鼠复制模型的同时给予开心散进行干预研究。与模型组比较,行为学、组织病理学及免疫组化指标结果为开心散干预组大鼠学习时间缩短(P<0.05或P<0.01),穿越平台次数显著增加(P<0.0 1);开心散干预组大鼠大脑皮层及海马 CA3区神经元细胞数目增多,形态趋于正常组,A β 1-40表达降低,表明开心散对AD模型大鼠的各项指标具有改善作用。3.基于大鼠AD模型的开心散体内直接作用物质研究基于中药血清药物化学理论和方法,2 1分钟内完成了开心散干预 AD模型大鼠的含药血清 UP LC-HDM S色谱图的采集,共确认了 1 3个开心散干预AD模型后的血中移行成分,分别为腺苷(Adenosine)、L-尿苷(L-Uridine)、西伯利亚远志糖A1(Sibiricose A1)、苯甲酰乙酸乙酯(Ethyl benzoylacetate)、远志山酮(Polygalaxanthone Ⅲ)、2-羟基苯甲酸(2-Hydroxybenzonic acid)、细辛醛(Asarylaldehyde)、草酸二丁酯(Dibutyl oxalate)、α-细辛醚(α-Asarone)、β-细辛醚(β-Asarone)、Gominsin A、土莫酸(Tumulosic acid)、15-乙酰氧基-3-氧代-8,2 4 羊毛甾二烯-26-酸(1 5-Acetoxy-3-oxo lanosta-8,24-dien-21-oic acid)。其中,茯苓与石菖蒲中成分在AD模型状态下吸收入血未见报道。结论本文采用AlCl3联合D-gal成功复制了 AD大鼠模型,依据行为学测试、组织病理学变化及免疫组化指标,验证了开心散对阿尔兹海默症的预防作用。在开心散防治 AD 有效性的基础上,以中药血清药物化学理论及方法,运用 UPLC-HDMS/MS技术平台,确认了13个开心散干预AD模型后的血中移行成分,为进一步研究开心散防治阿尔兹海默症的药效物质基础及研发防治AD的新型药物提供了依据。