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【目的】
1、了解生命早期铅暴露对小鼠及子代海马回NMDAR及DNMT1的影响。
2、探讨生命早期铅暴露长期及隔代效应的表观遗传学机制。
【方法】
小鼠经母鼠饮用0.20%醋酸铅溶液进行铅暴露，暴露时间为孕13d至产后21d，暴露结束时抽检血铅值以验证动物造模结果。分别于小鼠4、8、12月龄及子代4月龄时，用ICP-MS法检测其血铅、脑铅值，用Q-PCR方法检测海马回NMDAR（NR1、NR2A、NR2B）及DNMT1mRNA表达水平，用Westernblot方法检测海马回NMDAR（NR1、NR2A、NR2B）及DNMT1蛋白表达水平，用免疫组化的方法检测海马回NMDAR（NR1、NR2A、NR2B）及DNMT1空间表达情况，并与对照组比较。
【结果】
产后21d，暴露组小鼠血铅水平达到人血铅标准（100μg/L）5倍多，能够模拟中低水平铅暴露，证实造模成功。
暴露组小鼠于21d及4、8、12月龄时血铅浓度分别为544.00μg/L、99.25μg/L、50.03μg/L、44.85μg/L，脑铅浓度分别为814.67μg/kg、201.00μg/kg、86.42μg/kg、25.40μg/kg，自产后21d停止暴露后，血、脑铅水平随时间明显下降，4月龄时血铅浓度已低于人血铅标准；对照组血铅波动在8.60μg/L~36.08μg/L，脑铅波动在7.32μg/L~19.60μg/kg。子代4月龄时暴露组与对照组血铅浓度分别为18.10μg/L和24.80μg/L，脑铅浓度分别为13.04μg/kg和10.36μg/kg，两组无明显差异。
暴露组小鼠4、8、12月龄时海马回NR1、NR2A、NR2B蛋白和mRNA表达水平均低于对照组，其中4、12月龄时差异有统计学意义（P＜0.05）。暴露组子代4月龄时海马回NR1、NR2A、NR2B蛋白和mRNA表达水平也低于对照组，其中NR2A、NR2B的蛋白表达有统计学意义（P＜0.05）。暴露组脑海马NR1、NR2A、NR2B免疫组化结果也呈类似趋势，NR1、NR2A水平降低见于海马各分区（CA1、CA3、DG），而NR2B水平降低主要见于CA1、CA3。
暴露组小鼠4、8、12月龄时海马回DNMT1蛋白和mRNA表达水平均低于对照组，其中4、12月龄时蛋白表达水平差异有统计学意义（P＜0.05），8、12月龄时mRNA表达水平差异也有显著性（P＜0.05）。暴露组子代4月龄时海马回DNMT1蛋白和mRNA表达水平也低于对照组，其中mRNA表达水平差异有统计学意义（P＜0.05）。暴露组脑海马DNMT1免疫组化结果也呈类似趋势，暴露组小鼠4月龄时DNMT1水平降低见于海马各分区（CA1、CA3、DG），8和12月龄时DNMT1水平降低主要见于CA1、CA3。暴露组子代4月龄时DNMT1水平降低在各分区（CA1、CA3、DG）均存在。
暴露组小鼠4、8、12月龄及子代4月龄时海马回NR1、NR2A、NR2B表达与同阶段海马回DNMT1表达呈相同趋势。
【结论】
1、生命早期铅暴露能降低小鼠及子代海马回NMDAR的表达水平。
2、生命早期铅暴露能降低小鼠及子代海马回DNMT1的表达水平。
3、生命早期铅暴露小鼠及子代NMDAR表达改变可能与DNMT1有关，提示生命早期铅暴露可能通过表观遗传机制导致长期及隔代效应。
1、了解生命早期铅暴露对小鼠及子代海马回NMDAR及DNMT1的影响。
2、探讨生命早期铅暴露长期及隔代效应的表观遗传学机制。
【方法】
小鼠经母鼠饮用0.20%醋酸铅溶液进行铅暴露，暴露时间为孕13d至产后21d，暴露结束时抽检血铅值以验证动物造模结果。分别于小鼠4、8、12月龄及子代4月龄时，用ICP-MS法检测其血铅、脑铅值，用Q-PCR方法检测海马回NMDAR（NR1、NR2A、NR2B）及DNMT1mRNA表达水平，用Westernblot方法检测海马回NMDAR（NR1、NR2A、NR2B）及DNMT1蛋白表达水平，用免疫组化的方法检测海马回NMDAR（NR1、NR2A、NR2B）及DNMT1空间表达情况，并与对照组比较。
【结果】
产后21d，暴露组小鼠血铅水平达到人血铅标准（100μg/L）5倍多，能够模拟中低水平铅暴露，证实造模成功。
暴露组小鼠于21d及4、8、12月龄时血铅浓度分别为544.00μg/L、99.25μg/L、50.03μg/L、44.85μg/L，脑铅浓度分别为814.67μg/kg、201.00μg/kg、86.42μg/kg、25.40μg/kg，自产后21d停止暴露后，血、脑铅水平随时间明显下降，4月龄时血铅浓度已低于人血铅标准；对照组血铅波动在8.60μg/L~36.08μg/L，脑铅波动在7.32μg/L~19.60μg/kg。子代4月龄时暴露组与对照组血铅浓度分别为18.10μg/L和24.80μg/L，脑铅浓度分别为13.04μg/kg和10.36μg/kg，两组无明显差异。
暴露组小鼠4、8、12月龄时海马回NR1、NR2A、NR2B蛋白和mRNA表达水平均低于对照组，其中4、12月龄时差异有统计学意义（P＜0.05）。暴露组子代4月龄时海马回NR1、NR2A、NR2B蛋白和mRNA表达水平也低于对照组，其中NR2A、NR2B的蛋白表达有统计学意义（P＜0.05）。暴露组脑海马NR1、NR2A、NR2B免疫组化结果也呈类似趋势，NR1、NR2A水平降低见于海马各分区（CA1、CA3、DG），而NR2B水平降低主要见于CA1、CA3。
暴露组小鼠4、8、12月龄时海马回DNMT1蛋白和mRNA表达水平均低于对照组，其中4、12月龄时蛋白表达水平差异有统计学意义（P＜0.05），8、12月龄时mRNA表达水平差异也有显著性（P＜0.05）。暴露组子代4月龄时海马回DNMT1蛋白和mRNA表达水平也低于对照组，其中mRNA表达水平差异有统计学意义（P＜0.05）。暴露组脑海马DNMT1免疫组化结果也呈类似趋势，暴露组小鼠4月龄时DNMT1水平降低见于海马各分区（CA1、CA3、DG），8和12月龄时DNMT1水平降低主要见于CA1、CA3。暴露组子代4月龄时DNMT1水平降低在各分区（CA1、CA3、DG）均存在。
暴露组小鼠4、8、12月龄及子代4月龄时海马回NR1、NR2A、NR2B表达与同阶段海马回DNMT1表达呈相同趋势。
【结论】
1、生命早期铅暴露能降低小鼠及子代海马回NMDAR的表达水平。
2、生命早期铅暴露能降低小鼠及子代海马回DNMT1的表达水平。
3、生命早期铅暴露小鼠及子代NMDAR表达改变可能与DNMT1有关，提示生命早期铅暴露可能通过表观遗传机制导致长期及隔代效应。