链霉菌中抗生素的生物合成受控于细胞内的调控基因,包括全局性调控基因和途径专一性调控基因。为了从棒状链霉菌NRRL 3585中寻找全局性调控基因,我们构建了棒状链霉菌的cosmid基因组文库。文库中共有2400个克隆(覆盖了基因组7倍)。基因组文库的宿主菌是一株含有接合转移帮助质粒pUZ8002的大肠杆菌。这一独创设计使这个大肠杆菌既可以当做文库的宿主菌,又可以直接作为接合转移的供体菌。用高通量接合转移的方式将基因组文库高效的转移到变铅青链霉菌中去异源表达。利用变铅青链霉菌中含有的两个几乎沉默的抗生素合成基因簇——放线紫红素基因簇和钙依赖抗生素基因簇作为报告系统来筛选文库中的调控基因。文库中有许多cosmid都能使变铅青链霉菌中的放线紫红素和钙依赖抗生素产量提高,这说明这些cosmid中可能含有控制抗生素产量的正调控基因。从这些cosmid中我们找到了一个来自棒状链霉菌的全局性调节因子AfsR。将afsR克隆下来重新接合转移到棒状链霉菌中,使其拷贝数增加。增加了afsR拷贝数的棒状链霉菌克拉维酸的产量提高了5倍,同时一个沉默的全霉素的基因簇也被激活了。