目的：在体外复苏培养人牙周膜成纤维细胞基础上,采用免疫组化法检测羧甲基壳聚糖对LPS干预人牙周膜成纤维细胞表达PGE2及IL-6的影响,探讨羧甲基壳聚糖在牙周炎治疗中的作用机制及可行性,期望为牙周病的治疗提供新的思路,为进一步寻找治疗牙周病的牙周病新型药提供实验依据。方法：①复苏培养人牙周膜成纤维细胞,镜下观察细胞形态,免疫组化法检测细胞角蛋白及波丝蛋白的表达情况,确定其来源,建立稳定的人牙周膜成纤维细胞模型。②选取4-5代细胞培养并爬片,不同浓度LPS对细胞进行干预,以无血清的DMEM为阴性对照组,观察24h后各组细胞形态学变化,运用免疫组织化学方法检测PGE2及IL-6的表达变化情况,利用医学图像分析系统对结果进行图像分析和数据收集,分析结果,筛选出适宜LPS干预浓度。③建立适宜LPS干预浓度干预人牙周膜成纤维细胞模型,用不同浓度羧甲基壳聚糖(Omg/L、0.1mg/L、1mg/L、10mg/L、50mg/L、100mg/L)对细胞进行干预,24h后观察细胞形态变化,仍采用免疫组化法对细胞表达的PGE2及IL-6进行检测,利用医学图像分析系统对结果进行图像分析和数据收集,采用方差分析法,对经羧甲基壳聚糖及LPS干预后的人牙周膜成纤维细胞中PGE2及IL-6的表达特征进行数据统计。结果：①复苏冻存的人牙周膜成纤维细胞,培养液清亮无杂质,镜下未见异常物质,细胞表现为长梭形及星形,胞体丰满,胞质均匀,胞核圆形或卵圆形。抗波形丝蛋白多克隆抗体在细胞中呈阳性表达,抗细胞角蛋白染色阴性,证实细胞来源于间叶组织,而非上皮组织。②不同浓度LPS刺激HPDLFs后,PGE2及IL-6的表达变化均为随着LPS干预浓度的增加,胞浆染色先加重后减轻,且在LPS浓度为10mg/L时,胞浆染色最重,说明PGE2及IL-6阳性表达最强,图像分析结果表明其差异具有统计学意义(P<0.05)。③用不同浓度的羧甲基壳聚糖均能够降低用适宜浓度(10mg/L)LPS干预的人牙周膜成纤维细胞表达PGE2及IL-6,并且随羧甲基壳聚糖浓度的增加PGE2及IL-6的表达量呈现逐渐下调趋势,结果显示：图像分析结果表明其差异具有统计学意义(P<0.05)。结论：①复苏培养的人牙周膜成纤维细胞体外模型,操作简单,污染率低,来源明确,生物学特性显著,能够稳定的用于实验研究。②LPS干预人牙周膜成纤维细胞后PGE2及IL-6的表达水平发生显著改变,说明PGE2及IL-6参与牙周炎的发生、发展,是牙周炎发展进程中的重要细胞因子,因此选用这两个因子来探讨羧甲基壳聚糖对牙周炎可能起到的调控作用。③羧甲基壳聚糖对LPS干预人牙周膜成纤维细胞炎症损伤过程中表达PGE2及IL-6起到重要的抑制作用,推测羧甲基壳聚糖可能在牙周炎的发展过程中起到重要的作用,这将为临床牙周病的药物治疗提供新的实验资料。