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大蓟(Cirsium japonicum DC)是一种菊科蓟属植物,它具有凝血止血、抗菌消炎、降血压,抗糖尿病和抗肿瘤等功效。大蓟的活性成分有很多种,包括黄酮和黄酮苷类、挥发油类、长链烯炔醇类、三萜和甾醇类、多糖和生物碱等。目前在大蓟的各种活性物质中研究最多的是大蓟黄酮,而对于大蓟多糖的研究却有待进一步展开。本文对大蓟多糖的提取分离、结构特征和药理活性进行了研究。采用热水浸提法得到含大蓟多糖的提取液,利用乙醚脱脂和除蛋白,经过透析和冷冻干燥后得到大蓟粗多糖干品。再用DEAE-Cellulose柱层析法纯化大蓟多糖。检测表明样品中糖含量为91.6%,主要由190.0 kDa、45.6 k Da和3.9 k Da三种分子量不同的组分组成,含10.4%糖醛酸,蛋白含量为2.9%。利用高碘酸氧化和Smith降解的方法对大蓟多糖的结构进行分析,结果显示大蓟多糖具有复杂的分支结构,存在大量不能被高碘酸氧化的糖苷键。红外光谱分析结果表明,大蓟多糖主要含-OH、-COOH、-C≡C-和吡喃环等官能团。体外DPPH自由基和羟自由基的清除实验和大蓟多糖对小鼠体内抗氧化指标(GSH、MDA、SOD和ALT)影响的检测结果显示,大蓟多糖有较强的自由基清除能力,并且显著降低肝脏中MDA的含量,表明大蓟多糖具有较好的抗氧化活性。同时还检测了大蓟多糖在体内和体外对小鼠免疫功能的影响(以免疫细胞活性,脾脏指数、胸腺指数和血液中补体的含量为指标),结果显示大蓟多糖在体外能显著增强NK细胞的自然杀伤活性,增强脾脏淋巴细胞的增殖与转化能力和巨噬细胞的吞噬能力,在体内提高小鼠的脾脏指数以及血液中补体(C3)的含量,说明大蓟多糖具有免疫调节活性。此外本文利用报告基因法中探究了大蓟多糖在Hela细胞分别对不同信号通路的转录因子(Rb、p53和ISRE)活化的影响。结果表明大蓟多糖可以显著上调Rb和p53的活化,而抑制ISRE的活化,暗示大蓟多糖可能具有抗肿瘤和调节免疫的作用机理。本研究将有力地推动大蓟潜在的药物活性成分的挖掘以及活性研究,为大蓟的临床应用奠定实验理论基础。