量子点标记荧光免疫吸附测定法的建立和应用

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近年来,食品安全的问题引起了全世界的普遍关注,尤其是动物性食品中抗生素残留超标的问题。建立一种灵敏、快速、安全、经济的生物学检测方法成为国内外研究的热点。随着纳米技术的快速发展,一种新型的荧光半导体纳米微晶体——量子点问世,而结合量子点进行兽药残留的快速检测是分析领域的一条新途径。 本试验首次将纳米材料——量子点应用于兽药残留检测,建立了鸡肌肉组织中恩诺沙星(Enrofloxacin,ENR)和磺胺二甲嘧啶(Sulfamethazine,SM2)残留检测的量子点标记荧光免疫吸附测定方法(fluorescence-linkedimmunosorbentassay,FLISA)。并且将FLISA方法与酶联免疫检测方法(enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA)方法和高效液相色谱法(high-performanceliquidchromatography,HPLC)进行了比较,以此来验证量子点标记的荧光免疫吸附测定法进行兽药残留检测的可行性。 以ENR的单克隆抗体建立的FLISA方法中,检测限为2.5ng/g。在鸡肌肉中添加50、100、200ng/g三个浓度,回收率在81.0%~94.7%之间,变异系数在9.9%~13.0%之间。在实际样品的检测中,将FLISA方法与ELISA方法测定的结果进行比较,没有显著性差异(t=0.789,P>0.05);FLISA方法与HPLC方法测定的结果进行比较,没有显著性差异(t=0.252,P>0.05)。 以SM2的单克隆抗体建立的FLISA方法中,检测限为1.0ng/g。在鸡肌肉中添加50、100、200ng/g三个浓度,回收率在80.6%~117.4%之间,变异系数在6.9%~9.6%之间。在实际样品的检测中,FLISA方法测定的结果与ELISA方法和HPLC方法的结果相似。 本试验结果表明,量子点标记的FLISA方法可以用于恩诺沙星和磺胺二甲嘧啶在鸡肌肉组织中的残留检测,满足农业部规定的兽药残留分析的要求,为该方法用于其它药物的残留分析奠定了科学依据。
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